Dimethyl-eEF1A-K55 (P68104/Q05639) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eEF1A-Funktion und Lokalisierung

• eEF1A (eukaryotischer Elongationsfaktor 1A) existiert als zwei Isoformen, eEF1A1 (Gen EEF1A1, GeneID: 1915) und eEF1A2 (Gen EEF1A2, GeneID: 1917), beide hochkonservierte Translations-Elongationsfaktoren. Sie katalysieren die GTP-abhängige Bindung von Aminoacyl-tRNA an die ribosomale A-Stelle während der Elongation der Proteinsynthese PMID:26593721, PMID:26651998, PMID:36123449, PMID:36264623, PMID:36638793.
• Über die Translation hinaus fördert eEF1A1 das Aktin-Bündeln für die Zytoskelettorganisation und bildet in T-Helfer-1-Zellen einen Komplex mit TXK und PARP1, um die IFNG-Transkription positiv zu regulieren PMID:17177976. EEF1A1 wird auch für die Translation viraler Proteine während einer SARS-CoV-2-Infektion benötigt PMID:33495306.
• EEF1A1 wird breit exprimiert, während EEF1A2 hauptsächlich im Gehirn, Herz und Skelettmuskel vorkommt. Subzellulär lokalisiert EEF1A1 im Zytoplasma, Zellkern, Nukleolus und an der Zellmembran; EEF1A2 lokalisiert an der Membran des endoplasmatischen Retikulums PMID:19158340, PMID:8650580, PMID:26497934, PMID:36697828.
• Lysin 55 (K55) ist eine konservierte Dimethylierungsstelle (N6,N6-Dimethyllysin) sowohl in eEF1A1 als auch in eEF1A2, wie durch Proteomik identifiziert PMID:30143613, PMID:30612740. In eEF1A2 kann K55 auch trimethyliert sein. Diese Modifikationen können Proteininteraktionen und die Translationsgenauigkeit regulieren.
• Mutationen in EEF1A2 werden mit neuroentwicklungsbedingten Störungen wie Epilepsie und geistiger Behinderung in Verbindung gebracht, was die biomedizinische Bedeutung der eEF1A2-Regulierung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein dimethyliertes K55-Peptid von eEF1A generiert; er sollte spezifisch die Dimethyl-K55-Form erkennen. Bestätigen Sie die Spezifität durch Peptidkompetition (dimethyliert vs. unmodifiziert) oder durch Behandlung von Proben mit einer Demethylase.
• Für WB migrieren eEF1A1 (~50,1 kDa) und eEF1A2 (~50,5 kDa) bei ~50 kDa. Verwenden Sie Standard-SDS-PAGE- und Transferbedingungen. Validieren Sie in humanen Zelllinien (z. B. HeLa für EEF1A1, SH-SY5Y für EEF1A2).
• Für ELISA: Beschichten Sie mit dimethyliertem Peptid oder Zelllysat; schließen Sie nicht-methylierten Kontrollen ein, um die Kreuzreaktivität zu bewerten.
• Angesichts der Rolle von eEF1A in der Translation, Krebsbiologie und viralen Replikation kann dieser Antikörper Studien zur methylierungsabhängigen Regulation unter verschiedenen physiologischen und pathologischen Bedingungen unterstützen.

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