DHFR Kaninchen mAb für WB, ELISA - P00374

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DHFR

• DHFR (Dihydrofolatreduktase) ist ein entscheidendes Enzym im Folsäurestoffwechsel. Es katalysiert die NADPH-abhängige Reduktion von 7,8-Dihydrofolat zu 5,6,7,8-Tetrahydrofolat, das für die De-novo-Synthese von Thymidylat, Glycin und Purinen sowie die Produktion von DNA-Vorläufern essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:12096917 PMID:15039552 PMID:17569517 PMID:21876188 PMID:22235121
• Es bindet seine eigene mRNA sowie die von DHFR2, was auf einen autoregulatorischen Mechanismus im Folsäurestoffwechsel hindeutet.
• DHFR kommt in Mitochondrien, Zytoplasma und Kern vor, was seine multifunktionalen Rollen in verschiedenen Zellkompartimenten widerspiegelt.
• Das Protein ist weithin in fötalen und adulten Geweben exprimiert, mit einer deutlich höheren Expression im erwachsenen Gehirn im Vergleich zum fötalen Gehirn.
• Alternatives Spleißen und Polymorphismen im DHFR-Gen sind mit Methotrexat-Resistenz verbunden, ein wichtiger Aspekt bei der Krebstherapie.
• Gehört zur Familie der Dihydrofolatreduktasen; wirkt als Oxidoreduktase und RNA-bindendes Protein.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der Zentralregion (AS 88–187) der menschlichen DHFR; diese Sequenz ist bei Maus und Ratte weitgehend konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blott erwarten Sie eine Bande bei etwa 21 kDa; verwenden Sie für Ihre Probenart passende Positiv- und Negativkontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei ELISA-Anwendungen empfehlen wir, diesen Antikörper mit einem Fangantikörper zu kombinieren, der ein anderes Epitop erkennt, um ein Sandwich-Format zu entwickeln.
• Die DHFR-Expression kann durch Antifolate wie Methotrexat moduliert werden; berücksichtigen Sie mögliche Schwankungen in Ihrem experimentellen System.

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