Cytochrom c Kaninchen mAb - P99999

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cytochrom-c-Funktion und Lokalisierung

• Cytochrom c ist ein kleines Hämprotein (Molekulargewicht ~11,7–12 kDa), das beim Menschen durch das CYCS-Gen kodiert wird. Es ist ein gut konservierter Elektronencarrier, der für die mitochondriale Funktion und Apoptose essentiell ist.
• Als Bestandteil der Elektronentransportkette transportiert Cytochrom c Elektronen zwischen Komplex III (Cytochrom-c-Reduktase) und Komplex IV (Cytochrom-c-Oxidase) innerhalb des mitochondrialen Intermembranraums.
• Über seine Rolle in der Atmungskette hinaus ist Cytochrom c ein kritischer Mediator der Apoptose. Die Freisetzung von Cytochrom c aus den Mitochondrien in das Cytosol löst die Bildung des Apoptosoms aus, aktiviert Caspase-9 und initiiert die Caspase-Kaskade, die zum Zelltod führt.
• Das Protein ist unter normalen physiologischen Bedingungen hauptsächlich im mitochondrialen Intermembranraum lokalisiert. Bei apoptotischen Stimuli wird es durch Mechanismen, die Bcl-2-Familienproteine und die Permeabilisierung der mitochondrialen Außenmembran betreffen, in das Cytoplasma freigesetzt.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, regulieren die Konformation und Funktion von Cytochrom c und beeinflussen sowohl die Effizienz des Elektronentransports als auch seine pro-apoptotische Aktivität.
• Mit Cytochrom c assoziierte Schlüsselwörter umfassen: 3D-Struktur, Apoptose, Elektronentransport, Häm, Eisen, Metallbindung, Mitochondrium, Phosphoprotein und Atmungskette.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das reife Cytochrom-c-Protein in voller Länge (Aminosäuren 1–105), das aufgrund der hohen Sequenzkonservierung die Erkennung der nativen Konformation über mehrere Spezies hinweg unterstützen sollte.
• Für Western Blot (WB) sollten sowohl reduzierende als auch nicht-reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, da die Freisetzung des Proteins aus Mitochondrien und die Häm-Bindung die Wanderung beeinflussen können; validieren Sie den Antikörper in relevanten Zelllysaten (z. B. Cytosol- vs. Mitochondrienfraktionen).
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) werden Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung) und optimierte Antikörperverdünnung für formalinfixierte, paraffineingebettete Gewebe empfohlen, um die mitochondriale oder cytosolische Cytochrom-c-Lokalisierung nachzuweisen.
• Für ELISA kann die Kombination dieses monoklonalen Antikörpers mit einem zweiten Antikörper, der auf ein anderes Epitop abzielt, den Nachweis im Sandwich-ELISA ermöglichen; validieren Sie das Paar in gespikten Proben oder biologischen Matrices, die für die Apoptoseforschung relevant sind.

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