CTCF-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - P49711

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CTCF

• CTCF (Transkriptionsrepressor CTCF), auch als 11-Zinkfinger-Protein und CCCTC-bindender Faktor bezeichnet, ist ein ubiquitär exprimierter chromatinbindender Faktor, der in primären Spermatocyten nicht vorhanden ist.
• Es bindet an spezifische DNA-Sequenzen und reguliert die dreidimensionale Architektur des Chromatins, indem es Schleifen bildet und DNA an der Kernlamina verankert und dadurch das Genom organisiert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:16949368, PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• CTCF definiert durch Bindung an Chromatinisolatoren die Grenzen zwischen aktiver und heterochromatischer DNA und blockiert dadurch unangemessene Wechselwirkungen zwischen Enhancern und Promotoren.
  Zugehörige Referenzen: PMID:18347100, PMID:18654629, PMID:19322193
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der allelspezifischen Expression am geprägten IGF2/H19-Genlocus, an dem die Bindung an das mütterliche Allel eine Chromatinkonformation herstellt, die den Zugang des Enhancers zu IGF2 einschränkt.
  Zugehörige Referenzen: PMID:16107875, PMID:16815976, PMID:17827499
• CTCF bindet bevorzugt an unmethylierte DNA und trägt zur Aufrechterhaltung methylierungsfreier Bereiche bei, während seine Bindung durch CpG-Methylierung verhindert wird.
  Zugehörige Referenzen: PMID:18413740
• Es fungiert als dualer Transkriptionsregulator, indem es MYC und BAG1 reprimiert und gleichzeitig das APP-Gen aktiviert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:8649389, PMID:9591631, PMID:9407128
• CTCF ist an der Kohäsion von Schwesterchromatiden beteiligt und lokalisiert sich während der Mitose an den Zentromeren, wo es CENPE in perizentromerische Regionen rekrutiert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:12191639, PMID:18550811, PMID:26321640
• Es gilt als Tumorsuppressor und ist für die frühe Embryonalentwicklung essenziell, wobei es die Transkription in Oozyten und Präimplantationsembryonen reguliert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:12191639

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Region (Aminosäuren 1–260) des menschlichen CTCF, wodurch möglicherweise die Zugänglichkeit des nativen Proteins in Chromatin-Immunpräzipitationsassays (ChIP) verbessert wird.
• Beim Western Blot ist ein vorherrschendes Band zu erwarten, das dem berechneten Molekulargewicht von etwa 83 kDa entspricht; posttranslationale Modifikationen können jedoch zusätzliche Banden verursachen. Wir empfehlen, Größe und Spezifität im relevanten Probensystem zu validieren.
• Angesichts der berichteten Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte sollten Anwender die Leistung des Antikörpers in der jeweiligen Spezies und im jeweiligen Gewebetyp bestätigen, da die Expressionsniveaus variieren können.
• Bei der Immunfluoreszenz zeigt CTCF eine nukleäre Lokalisation mit einer möglichen Anreicherung an den Zentromeren; geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten für jede Zelllinie optimiert werden.
• Bei Verwendung dieses polyklonalen Antikörpers für IP oder ELISA sollten geeignete Isotypkontrollen einbezogen und aufgrund der Variabilität zwischen Chargen verschiedene Antikörperverdünnungen getestet werden.

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