Cleaved PARP1 p25 Kaninchen-mAk für WB, IP, ELISA - P09874

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Cleaved PARP1 p25

• Poly-ADP-Ribosyltransferase, die die Poly-ADP-Ribosylierung von Proteinen vermittelt und eine Schlüsselrolle bei der DNA-Reparatur spielt, einschließlich der Basenexzisionsreparatur und Doppelstrangbrüchen. Verwandte Referenzen: PMID:17177976 PMID:18055453 PMID:18172500
• Wird von Caspase-3 und Caspase-7 an einer konservierten Stelle gespalten, um das p25-Fragment zu erzeugen, das in das Zytoplasma transloziert und die AIFM1-vermittelte Apoptose fördert. Verwandte Referenzen: PMID:33168626
• Lokalisiert sich unter normalen Bedingungen im Zellkern, im Nukleolus und an den Chromosomen; nach der Spaltung lokalisiert sich das p25-Fragment im Zytoplasma.
• Fungiert als Transkriptionsregulator: bindet an Nukleosomen und moduliert die Chromatinstruktur, um die RNA-Polymerase II zu reprimieren, und reguliert die Transkriptionsverlängerung sowohl positiv als auch negativ. Verwandte Referenzen: PMID:15607977 PMID:22464733
• Fungiert als negativer Regulator des cGAS-STING-angeborenen Immunwegs durch Vermittlung der Poly-ADP-Ribosylierung und Inaktivierung von CGAS. Verwandte Referenzen: PMID:32315358 PMID:32844745 PMID:35460603
• Interagiert nach DNA-Schäden mit HPF1, um die Aminosäurespezifität auf Serin umzuschalten, was zur Histon-ADP-Ribosylierung und Chromatin-Dekompaktion führt. Verwandte Referenzen: PMID:28190768 PMID:29954836 PMID:32028527

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot-Nachweis von gespaltenem p25 sollten Sie Kerneextrakte aus apoptotischen Zellen in Betracht ziehen, die mit Etoposid oder Staurosporin induziert wurden.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität, indem Sie Kontrollen mit Caspase-Inhibitor-Behandlung oder PARP1-Knockout-Lysate einschließen, um die Identität des Spaltbandes zu bestätigen.
• Optimieren Sie bei der Immunpräzipitation das Lysepuffer, um transiente Proteinwechselwirkungen zu erhalten, da PARP1 an dynamischen Reparaturkomplexen beteiligt ist.
• Für ELISA kann die Kombination mit einem Fangantikörper gegen den N-terminalen Bereich die Empfindlichkeit für den Nachweis von gespaltenem PARP1 verbessern.

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