Cleaved Gasdermin D (C-Terminus) Kaninchen-mAk - Q9D8T2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Gasdermin-D-Funktion und -Lokalisierung

• Gasdermin-D (Gsdmd) ist der Vorläufer eines porenbildenden Proteins, das entscheidend für Pyroptose ist, einen lytischen proinflammatorischen Zelltod. Nach der Spaltung durch inflammatorische Caspasen (CASP1, CASP4/CASP11) nach Inflammasom-Aktivierung oligomerisiert das N-terminale Fragment zu Membranporen mit einem Durchmesser von 10–15 nm, was die Freisetzung von IL-1β und IL-18 ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:26375003, PMID:26375259, PMID:26611636, PMID:27383986, PMID:29195811, PMID:29274245
• Die Gasdermin-D-Pore kann sich auch auf Mitochondrienmembranen bilden, wodurch mitochondriale DNA ins Zytosol freigesetzt wird, und kann extrazelluläre Bakterien direkt abtöten, indem sie an bakterielles Cardiolipin und Phosphoinositide bindet. Verwandte Referenzen: PMID:27383986, PMID:37001519
• Über Pyroptose hinaus hat Gasdermin-D eine Transkriptionskoaktivator-Funktion: Im oberen Dünndarm erzeugt die CASP3/CASP7-Spaltung ein N-terminales Fragment, das in den Kern translokiert und als Koaktivator für STAT1 dient, um CIITA und MHC-Klasse II zu induzieren und so die Nahrungstoleranz aufrechtzuerhalten. Verwandte Referenzen: PMID:37327784
• Die subzelluläre Lokalisierung ist dynamisch: Gasdermin-D findet sich im Zytoplasma, in Inflammasom-Komplexen, der Plasmamembran, der Mitochondrienmembran, dem Zellkern und wird nach der Porenbildung extrazellulär sezerniert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Palmitoylierung, Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Glykosylierung; das Protein enthält auch Isopeptidbindungen und transmembranäre β-Stränge.
• Gewebespezifität: Hoch exprimiert in Maus-Gehirnendothelzellen, was Gasdermin-D mit der Blut-Hirn-Schranken-Integrität und neuroinflammatorischen Prozessen verbindet.
• Allergen-induzierte Spaltung: Das Papain-Allergen kann Gasdermin-D spalten, um N-terminale Poren zu bilden, die spezifisch Interleukin-33 (IL-33) freisetzen und Typ-2-Immunantworten antreiben. Verwandte Referenzen: PMID:35749514, PMID:35794369

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Aufgrund des Immunogen-Designs (C-terminale Reste 277–376) kann dieser Antikörper sowohl das vollständige Gasdermin-D (~53 kDa) als auch das C-terminale Spaltfragment (~22 kDa) im Western Blot detektieren. Validieren Sie die Spaltungsmuster unter Verwendung von LPS/ATP-stimulierten Mausmakrophagen oder Caspase-1/11-Inhibitoren.
• Für die Immunpräzipitation erwägen Sie, den Antikörper zur Anreicherung von vollständigem Gasdermin-D oder seinem C-terminalen Fragment zu verwenden; optimieren Sie die Lyse- und Waschbedingungen, um Proteininteraktionen zu erhalten.
• Bei ELISA-Anwendungen könnte die Kombination dieses Antikörpers mit einem N-terminal-spezifischen Detektionsantikörper die Unterscheidung zwischen vollständigem und gespaltenem Gasdermin-D ermöglichen.

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