Gespaltenes Gasdermin B (C-Terminus), monoklonaler Kaninchenantikörper für WB und ELISA – Q8TAX9

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Gasdermin-B (GSDMB)

• Gasdermin-B (GSDMB) ist ein Mitglied der Gasdermin-Familie und fungiert als Vorläufer eines porenbildenden Proteins, das nach der Spaltung durch Granzyme A (GZMA) aus zytotoxischen T- und NK-Zellen die Pyroptose vermittelt (PubMed:32299851, PubMed:27281216).
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:32299851
  PMID:27281216
• Nach der Spaltung transloziert das N-terminale Fragment (N-terminales Gasdermin-B-Fragment) zur Plasmamembran, oligomerisiert und bildet Poren mit einem inneren Durchmesser von 10–15 nm, was zur Zelllyse und Pyroptose führt (PubMed:32299851, PubMed:36599845, PubMed:36991122). Das C-terminale Fragment bleibt im Volllängenprotein autoinhibitorisch.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:32299851
  PMID:36599845
  PMID:36991122
• Das Gen GSDMB erzeugt durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Spezifitäten für die Lipidbindung; einige Isoformen zielen auf eukaryotische Zellmembranen ab (z. B. durch Bindung an Phosphatidylinositolphosphate), während andere bevorzugt bakterielle Lipide wie Lipid A und Cardiolipin binden, um eine antibakterielle Pyroptose zu vermitteln (PubMed:34022140, PubMed:36157507).
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:34022140
  PMID:36157507
• Gasdermin-B besitzt außerdem nicht-pyroptotische Funktionen bei der Aufrechterhaltung und Reparatur von Epithelgewebe und fördert die Zellproliferation und -migration durch die Regulation der PTK2/FAK-vermittelten PDGFA-Phosphorylierung (PubMed:35021065).
  Zugehörige Referenz:
  PMID:35021065
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma und die Zellmembran; bei Aktivierung transloziert das Protein zur Membran.
• Eine Gewebeexpression wird in proliferierenden Zellen des Gastrointestinaltrakts beobachtet, einschließlich der Basalschicht des Ösophagus und des Isthmus bzw. Halses des Magens, was auf Funktionen bei der epithelialen Homöostase hindeutet.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Palmitoylierung und Ubiquitinierung; das Protein ist ein Lipoprotein mit Coiled-Coil-Domänen und einer transmembranösen Beta-Strang-Region.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen für diesen monoklonalen Kaninchenantikörper ist ein synthetisches Peptid, das den Bereich um Ser245 des humanen Gasdermin B (Isoform NP_001159430.1) abdeckt. Beim Western Blot sollte neben Volllängen- oder Isoformbanden im Bereich von 45 bis 47 kDa auch das gespaltene C-terminale Fragment bei etwa 18 kDa detektiert werden. Die Spezifität sollte anhand von Lysaten aus mit Granzyme A behandelten Zellen validiert werden, um die Spaltung zu induzieren.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper mit geeigneten Fang-/Detektionsantikörpern kombiniert oder zur direkten Detektion von Gasdermin-B-Fragmenten eingesetzt werden. Optimieren Sie die Bedingungen und validieren Sie sie mit rekombinantem Protein oder Zelllysaten aus relevanten humanen Proben.
• Da die Funktion von Gasdermin B die Translokation zur Membran und die Porenbildung umfasst, können Fraktionierungsassays oder Immunfluoreszenz in Betracht gezogen werden, um seine subzelluläre Umverteilung bei Aktivierung zu untersuchen. Diese Anwendungen sind jedoch nicht ausdrücklich aufgeführt und erfordern eine unabhängige Validierung.
• Als monoklonaler Kaninchenantikörper bietet er eine hohe Reproduzierbarkeit und geringe Chargen-zu-Chargen-Variabilität und eignet sich daher für Langzeitstudien.

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