Cleaved Caspase-7 Rabbit mAb für WB, ELISA - P55210

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-7-Funktion und -Lokalisierung

• Caspase-7 ist eine Thiol-Protease, die an verschiedenen programmierten Zelltodprozessen teilnimmt, einschließlich Apoptose, Pyroptose und Granzym-vermitteltem Tod, durch proteolytische Spaltung von Zielproteinen. Sie wird als inaktives Zymogen produziert und erfordert eine proteolytische Spaltung für die Aktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:11257230 PMID:11257231 PMID:11701129

• Sie zeigt eine starke Präferenz für die Spaltung nach Asp-Glu-Val-Asp (DEVD)-Konsensussequenzen, mit gewisser Flexibilität für alternative nicht-kanonische Sequenzen. Verwandte Referenzen: PMID:12824163 PMID:15314233 PMID:17697120

• Als Effektor-Caspase in der Exekutionsphase der Apoptose spaltet sie wichtige Substrate einschließlich CLSPN, PARP1, PTGES3 und YY1. Sie gilt als untergeordneter Exekutor im Vergleich zu CASP3 und spaltet eine begrenztere Menge an Zielen. Verwandte Referenzen: PMID:10497198 PMID:16123041 PMID:16374543 PMID:18723680

• Sie fungiert als Schlüsselregulator der Entzündungsantwort, indem sie die Sphingomyelin-Phosphodiesterase SMPD1 im extrazellulären Milieu spaltet und aktiviert, wodurch die Membranreparatur während einer bakteriellen Infektion gefördert wird. Sie reguliert auch die Pyroptose in intestinalen Epithelzellen und den granzym-vermittelten programmierten Zelltod in Hepatozyten. Verwandte Referenzen: PMID:21157428

• Nach Spaltung durch CASP1 als Reaktion auf die Aktivierung des Inflammasoms verarbeitet und inaktiviert Caspase-7 PARP1 und lindert so die Transkriptions-Repressoraktivität von PARP1. Verwandte Referenzen: PMID:22464733

• Sie spaltet und aktiviert Sterol-Regulator-Element-bindende Proteine (SREBPs) und verknüpft so die Apoptose mit dem Lipidstoffwechsel. Verwandte Referenzen: PMID:8643593

• Subzellulär kommt Caspase-7 überwiegend im Zytosol und Kern vor und kann auch in den extrazellulären Raum sezerniert werden.

• Gewebeexpression: hoch exprimiert in Lunge, Skelettmuskel, Leber, Niere, Milz und Herz; mäßig in Hoden; und nicht im Gehirn.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Western Blot-Analyse empfehlen wir die Verwendung von Zelllysaten, die mit Apoptose-Induktoren (z. B. Staurosporin oder TNF-α/Cycloheximid) behandelt wurden, um die gespaltene aktive Form von Caspase-7 zu erzeugen. Die Pro-Form hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von 34 kDa, während die gespaltenen Fragmente (p20 und p11) mit niedrigeren Molekulargewichten laufen. Validieren Sie dies in Ihrer spezifischen Zelllinie und unter Ihren Behandlungsbedingungen.

• Dieser Antikörper ist für ELISA validiert und kann als Capture- oder Nachweis-Antikörper in Sandwich-ELISA-Formaten verwendet werden, um die Spiegel von gespaltenem Caspase-7 in Zelllysaten oder Kulturüberständen zu quantifizieren. Eine Optimierung der Beschichtungskonzentration und der Probenverdünnung wird empfohlen.

• Die Kreuzreaktivität ist für menschliche Proben bestätigt; die Reaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet. Wenn Sie mit nicht-menschlichen Modellen arbeiten, sollten Sie eine Sequenzausrichtung und eine experimentelle Validierung durchführen.

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