Citrullin-Histon H3 (R8 Citrullinierung) Kaninchen monoklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, DB, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die für das Wickeln und Verdichten von DNA in Chromatin verantwortlich ist. Diese strukturelle Rolle ist entscheidend für die Regulierung der Zugänglichkeit von DNA und steuert somit fundamentale Prozesse wie Transkription, DNA-Reparatur, Replikation und chromosomale Stabilität. Histone, einschließlich H3, unterliegen einer komplexen Reihe posttranslationaler Modifikationen – oft als „Histon-Code“ bezeichnet –, die die Chromatinstruktur und die Genexpression dynamisch modulieren.

Dieser Antikörper erkennt spezifisch die Citrullinierung an Arginin 8 (R8) von Histon H3. Die Citrullinierung, die Umwandlung von Arginin in Citrullin, wird durch Peptidylarginin-Deiminasen (PADs) vermittelt und wurde mit der Genregulierung, NETose und Autoimmunerkrankungen in Verbindung gebracht. Es ist bekannt, dass Histon H3 an mehreren Resten citrulliniert wird, darunter R3, R8, R17 und R26, und diese Modifikationen können die Chromatinverdichtung beeinflussen. Verwandte Bezüge: PMID:16567635.

Die beiden SWISS-PROT-Accessions, die von diesem Antikörper abgedeckt werden, Q16695 (Histon H3.1t) und P68431 (Histon H3.1), repräsentieren unterschiedliche Histon-Varianten. Q16695 ist ein testisspezifisches H3-Variant, das in Hodenzellen exprimiert wird, während P68431 dem kanonischen replikationsabhängigen Histon H3.1 entspricht, das ubiquitär exprimiert wird. Beide lokalisieren im Zellkern und auf den Chromosomen.

Histon H3 ist extensiv am N-terminalen Ende modifiziert, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und vielen anderen Markierungen. Diese Modifikationen werden dynamisch reguliert und dienen als Bindungsplattformen für chromatinmodifizierende Komplexe und steuern somit die zelluläre Identität und die Reaktion auf Umweltreize.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot (WB) sollten Sie 10–20 µg Ganzzell-Lysat pro Spur verwenden. Validieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem (z. B. stimulierte Zellen mit induzierter Citrullinierung) und fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• Für Dot Blot (DB) und ELISA optimieren Sie die Antigen-Beschichtungskonzentration und die Pufferbedingungen, um den spezifischen Nachweis von citrulliniertem Histon H3 zu gewährleisten. Ein synthetisches citrulliniertes Peptid um R8 kann als positive Kontrolle dienen.
• Da die Citrullinierung transient und enzymabhängig sein kann, sollte die Probenvorbereitung posttranslationale Modifikationen erhalten; erwägen Sie die Verwendung von PAD-Inhibitoren oder ein sofortiges Lyse mit geeigneten Phosphatase-/Proteaseinhibitoren.
• Dieser kaninchen monoklonale Antikörper kann verwendet werden, um die Citrullinierungsdynamik in verschiedenen menschlichen Probentypen zu untersuchen; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies ist breit vorhergesagt, aber Endanwender sollten dies in ihren spezifischen experimentellen Modellen verifizieren.

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