CDK9-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA – P50750

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK9

• CDK9 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die zusammen mit Cyclin T die katalytische Untereinheit des positiven Transkriptionselongationsfaktors b (P-TEFb) bildet. Dieser Komplex ist für die Transkriptionselongation durch die RNA-Polymerase II essenziell. Zugehörige Referenzen: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967

• P-TEFb phosphoryliert die C-terminale Domäne der RNA-Polymerase II (POLR2A) sowie die negativen Elongationsfaktoren DSIF und NELF und hebt dadurch deren hemmende Wirkung auf die Transkription auf. Außerdem phosphoryliert es Transkriptionsfaktoren wie EP300, MYOD1 und AR. Zugehörige Referenzen: PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670

• CDK9 moduliert ein komplexes Netzwerk von Chromatinmodifikationen, einschließlich der Monoubiquitinierung von Histon H2B (H2Bub1), der Trimethylierung von H3K4 (H3K4me3) und von H3K36me3, und integriert die Transkription mit der kotranskriptionellen Verarbeitung von Histon-mRNA. Zugehörige Referenzen: PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166

• CDK9 phosphoryliert Histon H1.4 an Ser-187, eine Modifikation, die mit der Transkriptionsaktivierung assoziiert ist. Zugehörige Referenzen: PMID:28539972

• Die Kinase spielt über den CDK9/Cyclin-K-Komplex eine Rolle bei der Reaktion auf Replikationsstress und der Aufrechterhaltung der Genomintegrität, indem sie die Erholung des Zellzyklus nach einem Replikationsarrest fördert und DNA-Schäden begrenzt. Zugehörige Referenzen: PMID:20493174

• Auf subzellulärer Ebene kommt CDK9 im Zellkern, in PML-Körperchen und im Zytoplasma vor und wird in menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 153–372 des humanen CDK9, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist und die angegebene Kreuzreaktivität unterstützt. Es sollte in Betracht gezogen werden, die Leistung in speziesspezifischen Probensystemen zu überprüfen.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 43 kDa. Verwenden Sie geeignete Lysate als Positivkontrolle (z. B. HeLa, Jurkat) und validieren Sie die Bandspezifität mit Knockdown-Kontrollen oder Blockierungspeptiden.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl natives als auch rekombinantes CDK9 nachweisen. Optimieren Sie die Konzentration des Beschichtungsantigens und führen Sie Titrationsexperimente durch, um geeignete Arbeitsverdünnungen zu bestimmen.
• Berücksichtigen Sie bei der Auswahl von Negativkontrollen und der Interpretation der Ergebnisse das ubiquitäre Expressionsmuster von CDK9.

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