CDK5RAP3-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA – Q96JB5

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK5RAP3

• Das mit der regulatorischen Untereinheit 3 der CDK5 assoziierte Protein (CDK5RAP3), auch bekannt als C53, IC53, LZAP, HSF-27, MST016, PP1553 oder OK/SW-cl.114, ist ein multifunktionales Adapterprotein, das vom CDK5RAP3-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als Substratadapter von E3-Ligase-Komplexen, die die Ufmylierung vermitteln, also die kovalente Anheftung des ubiquitinähnlichen Modifikators UFM1 an Zielproteine, und ist an wichtigen Prozessen wie dem Ribosomen-Recycling und der Retikulophagie (ER-Phagie) beteiligt.
  Zugehörige Referenzen: PMID:23152784, PMID:30635284, PMID:32851973, PMID:37595036
• Innerhalb des ribosomenassoziierten UREL-Komplexes fördert CDK5RAP3 die Mono-Ufmylierung des 60S-Ribosomenproteins RPL26/uL24 an Lys-134. Dadurch wird die Interaktion zwischen postterminierten 60S-Untereinheiten und SEC61-Translokons abgeschwächt, was die Freisetzung und das Recycling großer ribosomaler Untereinheiten von der Membran des endoplasmatischen Retikulums erleichtert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:38383785, PMID:38383789, PMID:36121123
• CDK5RAP3 ist außerdem an der Transkriptionsregulation beteiligt, indem es die NF-kappa-B-vermittelte Gentranskription durch Modulation der RELA-Phosphorylierung negativ kontrolliert, und spielt eine Rolle beim Übergang von der mitotischen G2- in die M-Phase sowie bei DNA-Schadens-Checkpoints.
  Zugehörige Referenzen: PMID:17785205, PMID:20228063, PMID:15790566, PMID:19223857
• Durch die Interaktion mit CDKN2A/ARF und MDM2 kann CDK5RAP3 möglicherweise die Ubiquitinierung, Stabilisierung und Aktivierung von p53/TP53 induzieren und dadurch den G1-Zellzyklusarrest fördern sowie die Zellproliferation hemmen.
  Zugehörige Referenzen: PMID:16173922
• Das Protein lokalisiert sich an der Membran des endoplasmatischen Retikulums, im Zytoplasma, im Zellkern sowie am Zentrosom/Zytoskelett und wird ubiquitär in Geweben wie Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Pankreas exprimiert; Isoform 3 wird in Niere, Leber, Skelettmuskel und Plazenta exprimiert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:10721722, PMID:12054757, PMID:12737517
• Zu den weiteren Funktionen gehören eine mögliche Beteiligung am Aufreißen der Kernhülle während der Apoptose sowie die Regulation der MAPK14-Aktivität durch Modulation ihrer Dephosphorylierung durch PPM1D/WIP1.
  Zugehörige Referenzen: PMID:23478299, PMID:21283629
• Im Zusammenhang mit mikrobiellen Infektionen kann CDK5RAP3 durch eine mutierte Form des großen Hüllproteins des Hepatitis-B-Virus (pre-S2) negativ reguliert werden, um den Eintritt in die Mitose zu fördern.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Beim Western Blot kann der Antikörper eine Bande bei etwa 57 kDa erkennen, die dem Volllängen-CDK5RAP3 entspricht; zur Bestätigung der Spezifität wird die Verwendung geeigneter humaner Positivkontrolllysate (z. B. aus Zelllinien oder Geweben, von denen bekannt ist, dass sie CDK5RAP3 exprimieren) sowie von Negativkontrollen empfohlen.
• Da es sich um einen gegen die N-terminalen Aminosäuren 1–300 des humanen CDK5RAP3 erzeugten polyklonalen Antikörper handelt, kann eine Kreuzreaktivität mit Spleißvarianten oder Paralogen, die diese Region enthalten, nicht ausgeschlossen werden; eine Validierung im relevanten experimentellen System wird empfohlen.
• Der Antikörper wird gemäß der Anwendungsliste des Herstellers für WB und ELISA empfohlen; für andere Techniken wie IHC oder IF sollten die Durchführbarkeit und optimalen Arbeitsbedingungen empirisch bestimmt werden.
• Angesichts der Beteiligung von CDK5RAP3 an der Ufmylierung und der Zellzyklusregulation sollte bei einer Forschungsausrichtung auf diese Signalwege eine Komplexanalyse oder Co-Immunpräzipitation mit relevanten Bindungspartnern in Betracht gezogen werden.
• Den Antikörper nach Erhalt gemäß den Empfehlungen lagern (Versand auf Kühlakkus); wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen sollten vermieden werden, um die Leistungsfähigkeit zu erhalten.

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