CD70-Kaninchen-pAb - P32970

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD70

• CD70 ist ein Typ-II-Transmembranprotein, das zur Liganden-Superfamilie des Tumornekrosefaktors (TNF) gehört und auch als CD27-Ligand (CD27L) oder TNFSF7 bekannt ist.
• Es wird primär auf aktivierten B-Zellen exprimiert, wo es als Ligand für den auf T-Zellen vorhandenen CD27-Rezeptor fungiert und den CD70-CD27-Signalweg vermittelt, der für die antigenspezifische Aktivierung und Expansion von T-Zellen entscheidend ist (PubMed:28011863, PubMed:28011864). Zugehörige Referenzen: PMID:28011863 PMID:28011864
• Die CD70-CD27-Interaktion liefert kostimulatorische Signale, die die Proliferation, das Überleben und die Effektorfunktion von T-Zellen fördern und zur Immunüberwachung von B-Zellen beitragen (PubMed:8387892). Zugehörige Referenz: PMID:8387892
• CD70 ist an der Zellmembran lokalisiert und verfügt über eine einzelne Transmembrandomäne sowie eine extrazelluläre TNF-Homologiedomäne, die die Rezeptorbindung vermittelt.
• Durch alternatives Spleißen des CD70-Gens entstehen mehrere Transkriptvarianten, die möglicherweise die Proteinexpression und -funktion beeinflussen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für die korrekte Proteinfaltung und Stabilität wichtig sind.
• CD70 wird unter Schlüsselwörtern wie „Krankheitsvariante“, „Glykoprotein“ und „Signalanker“ klassifiziert, was auf seine Beteiligung an pathologischen Zuständen und seinen Mechanismus der Membranverankerung hinweist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 47–126 des humanen CD70 und umfasst damit die extrazelluläre TNF-Domäne. Daher ist zu erwarten, dass der Antikörper die Ektodomäne von CD70 erkennt.
• Für den Western Blot sollten reduzierende Bedingungen mit DTT oder β-Mercaptoethanol in Betracht gezogen werden, um eine vollständige Denaturierung der durch Disulfidbrücken stabilisierten Strukturen zu gewährleisten, die die Migration beeinflussen können.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte der Antikörper in relevanten Positivkontrollgeweben (z. B. aktivierten B-Zell-Lymphomen oder lymphatischen Geweben) validiert werden, um die membranständigen Färbungsmuster zu bestätigen.
• Bei der Durchführung eines ELISA sollte der Antikörper mit einem CD70-spezifischen Fängerantikörper kombiniert oder rekombinantes CD70 direkt auf die Platte aufgetragen werden, um eine zuverlässige Standardkurve zu erstellen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte sollte die Sequenzhomologie des Immunogen-Epitops bei diesen Arten überprüft werden, um die erwartete Reaktivität in den jeweiligen Versuchsmodellen sicherzustellen.

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