CD59 Kaninchen pAb - P13987

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD59-Funktion und Lokalisierung

• Das CD59-Glykoprotein, auch bekannt als Protectin, HRF-20, MACIF, MIRL und MEM43-Antigen, ist ein potenter Inhibitor des Komplement-Membranangriffskomplexes (MAC).

Verwandte Referenzen: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:2475111, PMID:36797260

• Es wirkt, indem es an die C8- und C9-Komponenten des sich bildenden MAC bindet, die Einbindung mehrerer C9-Moleküle verhindert und so die Bildung der osmotischen Pore blockiert.

Verwandte Referenzen: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:36797260

• Die lösliche Form von CD59 (im Urin gefunden) behält die Komplementbindungsaktivität bei, zeigt jedoch eine stark reduzierte Fähigkeit, die MAC-Bildung auf Zellmembranen zu hemmen.
• CD59 ist hauptsächlich über einen GPI-Anker auf der Zellmembran lokalisiert und wird auch sezerniert.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen, und posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbindungsbildung, Glykierung und N-verknüpfte Glykosylierung.
• Mutationen im CD59-Gen sind mit hereditärer hämolytischer Anämie assoziiert, was seine kritische Rolle beim Schutz von Zellen vor komplementvermittelter Lyse widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 26-128 von humanem CD59) entspricht der extrazellulären Domäne, die auf der Zelloberfläche exponiert ist und wahrscheinlich sowohl unter nativen als auch denaturierten Bedingungen zugänglich ist, was die Anwendungen WB, IHC-P und ELISA unterstützt.
• Für den IHC-P-Nachweis dieses membrangebundenen Antigens sollten eine Antigen-Demaskierung in Betracht gezogen und das Antigen in Geweben validiert werden, von denen bekannt ist, dass sie CD59 exprimieren, wie z.B. Niere, vaskuläres Endothel oder hämatopoetische Zellen.
• Da CD59 ein GPI-verankertes Protein ist, kann es in Lipid Rafts lokalisiert sein; die Verwendung geeigneter Lysepuffer oder detergensresistenter Membranfraktionen kann den Nachweis im WB verbessern.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf ein konserviertes Epitop hin, aber Anwender sollten die Reaktivität in ihrer interessierenden Spezies und Probenart bestätigen.
• Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein (z.B. CD59-überexprimierende Lysate oder CD59-silenzierte Zellen), um die Antikörperspezifität in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.

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