CD1B Kaninchen pAb für WB, ELISA - P29016

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD1B-Funktion und Lokalisierung

• Das T-Zell-Oberflächenglykoprotein CD1b ist ein Mitglied der CD1-Familie von Antigen-präsentierenden Molekülen, die strukturell mit MHC-Klasse-I-Proteinen verwandt sind.
• CD1B bindet spezifisch selbst- und fremde Lipid- und Glykolipidantigene und präsentiert sie für T-Zell-Rezeptoren auf natürlichen Killer-T-Zellen (NKT-Zellen), was eine entscheidende Rolle in der adaptiven Immunität gegen mikrobielle Krankheitserreger spielt.
• Das Protein wird auf der Oberfläche von kortikalen Thymozyten, bestimmten T-Zell-Leukämien und in verschiedenen anderen Geweben exprimiert, was auf eine Rolle bei der Immunüberwachung hindeutet.
• CD1B lokalisiert an der Zellmembran und in intrazellulären Kompartimenten wie Endosomen- und Lysosomenmembranen, wo es in saurer Umgebung Lipidantigene lädt.
• Es enthält eine Immunglobulin-ähnliche Domäne, ein Signalpeptid, eine Transmembranhelix und einen kurzen cytoplasmatischen Schwanz, mit wichtigen strukturellen Merkmalen wie Disulfidbindungen und N-verknüpften Glykosylierungsstellen.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen von CD1B, die möglicherweise die Lokalisierung und Antigen-präsentierende Kapazität beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen, bestehend aus der extrazellulären Domäne (aa 18-303), legt nahe, dass dieser Antikörper sowohl natives als auch denaturiertes CD1B erkennen könnte.
• Für den Western Blot sollte ein reduzierendes Probenpuffer in Betracht gezogen werden, um die Disulfid-verbrückte Immunglobulin-Domäne vollständig zu denaturieren; Validierung in humanen Thymozytenlysaten oder CD1B-exprimierenden Zelllinien durchführen.
• Für ELISA die Beschichtungsantigen- und Antikörperkonzentrationen unter Verwendung von rekombinantem CD1B-Protein optimieren; der Antikörper könnte sowohl für direkte als auch Sandwich-Formate mit geeignetem sekundären Nachweis geeignet sein.
• Spezifität durch Vorinkubation mit Immunogen in Kompetitionsassays bestätigen und geeignete Kontrollen für Lipidpräsentationsstudien einschließen.

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