CD146/MCAM Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA – P43121

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD146/MCAM

• CD146, auch bekannt als MCAM, MUC18 und MelCAM, ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein, das beim Menschen vom MCAM-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als Adhäsionsmolekül und ist an der Kohäsion endothelialer Monoschichten an interzellulären Verbindungen beteiligt, wobei es eine entscheidende Rolle für die Integrität von Gefäßgewebe spielt.
• Die Expression von CD146 auf Melanomzellen erleichtert die Interaktion mit vaskulären Strukturen und fördert die hämatogene Tumorausbreitung und Metastasierung.
• Während der embryonalen Entwicklung kann CD146 als Adhäsionsmolekül in Neuralleistenzellen wirken und deren Migration unterstützen.
• Als Rezeptor löst CD146 die Tyrosinphosphorylierung der Kinasen FYN und FAK1 aus und induziert einen vorübergehenden Anstieg der intrazellulären Kalziumkonzentration.
• Das Protein ist in der Membran lokalisiert und wird in gesundem adultem Gewebe überwiegend in Endothelzellen und der glatten Gefäßmuskulatur nachgewiesen; eine erhöhte Expression steht mit dem Fortschreiten des malignen Melanoms in Zusammenhang.
• CD146 enthält extrazelluläre immunglobulinähnliche Domänen, eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 447–646, die innerhalb der extrazellulären Region von CD146 liegen; diese Region ist bei Mensch und Ratte konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 72 kDa erwartet (vorhergesagtes Molekulargewicht ca. 71,6 kDa), wobei Glykosylierung geringfügige Verschiebungen verursachen kann; validieren Sie die Bande mit geeigneten Positivkontrollen, beispielsweise Lysaten von Endothel- oder Melanomzellen.
• Für ELISA-Anwendungen können rekombinantes CD146 oder Zelllysate direkt aufgetragen werden; titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie geeignete sekundäre Nachweisreagenzien.
• Als polyklonaler Antikörper kann eine Chargen-zu-Chargen-Variabilität auftreten; erwägen Sie, in jedem Experiment eine bekannte Positivkontrolle oder Standardkurve einzubeziehen, um die Reproduzierbarkeit sicherzustellen.

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