CD11b Rabbit PolymAb® monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – P11215 / P05555

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ITGAM (CD11b)

• ITGAM kodiert Integrin Alpha-M (CD11b), einen Transmembranrezeptor, der sich mit Integrin Beta-2 (CD18) verbindet und den Mac-1-(CR3-)Komplex bildet, ein wichtiges Adhäsionsmolekül der angeborenen Immunität.
• Fungiert als Komplementrezeptor durch Bindung an das iC3b-Fragment von C3 und vermittelt die Phagozytose komplementopsonierter Pathogene (PubMed:20008295, PubMed:9558116). Zugehörige Referenzen: PMID:20008295 PMID:9558116
• Vermittelt die Adhäsion von Neutrophilen an stimulierte Endothelzellen durch Interaktion mit ICAM1 und erleichtert dadurch die Extravasation und Migration von Leukozyten (PubMed:1980124). Zugehörige Referenzen: PMID:1980124
• Ist zusammen mit CD18 für die durch CD177-PRTN3 vermittelte Aktivierung TNF-primierter Neutrophiler erforderlich und verstärkt dadurch Entzündungsreaktionen (PubMed:21193407). Zugehörige Referenzen: PMID:21193407
• Reguliert die Migration von Neutrophilen und trägt zur Abwehr durch die angeborene Immunität bei (PubMed:28807980). Zugehörige Referenzen: PMID:28807980
• Lokalisiert sich subzellulär an der Zellmembran und in Membranrafts, wo es mit Signalmolekülen interagiert.
• Wird überwiegend in Monozyten, Granulozyten und Neutrophilen exprimiert, was seiner auf myeloische Zellen beschränkten Funktion entspricht.
• Unterliegt alternativem Spleißen und umfassender N-Glykosylierung; enthält mehrere Calcium- und Magnesium-bindende Wiederholungen, die für seine Aktivität essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen Aminosäuren 1–100 des humanen CD11b; die Antikörperbindung kann beeinträchtigt sein, wenn die Epitopkarte innerhalb dieser Region liegt oder posttranslationale Modifikationen die Zugänglichkeit verändern.
• Beim Western Blot (WB) unter reduzierenden Bedingungen wird eine Bande bei ungefähr 127 kDa erwartet; die Verwendung eines Markers mit hohem Molekulargewicht und einer ausreichenden Proteintransferzeit wird empfohlen.
• Bei der Durchführung einer IHC-P-Analyse sollten verschiedene Methoden der Antigenfreilegung (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) sowie unterschiedliche Verdünnungen des Primärantikörpers getestet werden, um kern- bzw. membranspezifische Signale zu optimieren.
• Bei IF/ICC-Anwendungen sollten Zellpermeabilisierungsprotokolle und Fixierungsmethoden berücksichtigt werden, die die Integrität des Membranantigens erhalten; bestätigen Sie, dass die Lokalisation mit der erwarteten Färbung der Plasmamembran übereinstimmt.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit CD11b von Maus und Ratte; dennoch sollte er stets im relevanten Probensystem validiert werden, um die Spezifität sicherzustellen.
• Für ELISA kann dieser Antikörper als Fangantikörper in Sandwich-Paarungen zur Bestimmung von CD11b evaluiert werden; die Leistung sollte anhand rekombinanter Proteinstandards beurteilt werden.

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