CCL25 Kaninchen pAb für WB, ELISA - O15444

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CCL25-Funktion und -Lokalisation

• CCL25, auch bekannt als TECK (Thymus-Exprimiertes Chemokin), ist ein kleines Zytokin aus der Familie der CC-Chemokine, das eine Rolle beim Trafficking von Immunzellen spielt.
• Das Protein existiert in mindestens zwei Isoformen; Isoform 1 wirkt als Chemoattraktant über CCR9, während Isoform 2 als Antagonist von Isoform 1 fungiert und deren Aktivität moduliert.
• CCL25 wird überwiegend sezerniert und zeigt chemotaktische Aktivität gegenüber Thymozyten, Makrophagen, THP-1-Zellen und dendritischen Zellen, ist jedoch inaktiv auf peripheren Blutlymphozyten und Neutrophilen.
• Es bindet an den atypischen Chemokinrezeptor ACKR4 und vermittelt die Rekrutierung von Beta-Arrestin (ARRB1/2) an ACKR4, was auf eine Beteiligung an nicht-klassischer Chemokinsignalgebung hindeutet.
• Die Expression ist hochspezifisch: CCL25 wird in hohen Mengen im Thymus und Dünndarm gefunden und wird besonders von thymischen dendritischen Zellen exprimiert.
• Das Protein ist an der T-Zell-Entwicklung beteiligt und könnte zu Entzündungsreaktionen beitragen, was mit seinen chemotaktischen und zytokinen Funktionen übereinstimmt.
• Posttranslationale Merkmale umfassen ein Signalpeptid und Disulfidbrücken, die für sezernierte Chemokine charakteristisch sind, und es wurde in Proteomik-Studien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 24-150 des humanen CCL25 und deckt das reife sezernierte Protein ab; dieses Design könnte den Nachweis sowohl von Isoform 1 als auch von Isoform 2 begünstigen, wenn sie die Sequenz teilen.
• Für den Western Blot sollten reduzierende und nicht-reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, da Disulfidbrücken die Wanderung beeinflussen können; die vorhergesagte Größe beträgt 17 kDa, aber posttranslationale Modifikationen könnten leichte Verschiebungen verursachen.
• Der Antikörper wurde im Kaninchen erzeugt und erfordert möglicherweise geeignete Anti-Kaninchen-Sekundärnachweisreagenzien; validieren Sie ihn im relevanten Probensystem (z. B. Thymus- oder Dünndarmgewebe-Lysaten).
• Für ELISA verwenden Sie rekombinantes CCL25 als positive Kontrolle und optimieren Sie die Beschichtungskonzentrationen; Kreuzreaktivität mit anderen Chemokinen sollte ausgeschlossen werden, wenn Multiplexing durchgeführt wird.

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