CAPG-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P40121

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CAPG

• CAPG (Makrophagen-Capping-Protein, auch als Aktin-regulatorisches Protein CAP-G, MCP, AFCP oder HEL-S-66 bekannt) ist ein kalziumempfindliches aktinbindendes Protein, das die freien, mit zunehmender Polymerisation wachsenden Enden von Aktinfilamenten reversibel verschließt, ohne sie zu durchtrennen, und dadurch die Dynamik der Aktinpolymerisation reguliert.
• Es spielt eine wichtige Rolle bei der Makrophagenfunktion und kann durch potenzielle Wechselwirkungen mit Aktin und DNA auch zytoplasmatische und nukleäre Strukturen regulieren.
• CAPG wird überwiegend in Makrophagen und makrophagenähnlichen Zellen exprimiert, was seine spezifische Rolle bei den zytoskelettalen Umstrukturierungen von Immunzellen hervorhebt.
• Das Protein ist in verschiedenen subzellulären Kompartimenten lokalisiert, darunter im Zellkern, Zytoplasma, in Melanosomen, Lamellipodien und Membrankräuselungen, was mit seiner Beteiligung an der Zellmotilität und strukturellen Organisation übereinstimmt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität in zellulären Signalwegen modulieren können.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein enthält für die Familie der Aktin-regulatorischen Proteine Gelsolin/Villin charakteristische Wiederholungssequenzen.
• Strukturelle Studien haben seine 3D-Architektur aufgeklärt und dadurch Einblicke in seinen kalziumabhängigen Aktin-Capping-Mechanismus ermöglicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Region (AS 1–188), die Aktinbindungsdomänen enthält; daher kann der Antikörper sowohl CAPG in voller Länge als auch gegebenenfalls verkürzte CAPG-Formen erkennen.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 38 kDa. Die Spezifität der Bande sollte anhand positiver Kontrollen wie Makrophagenlysaten sowie, sofern verfügbar, Knockout- oder Knockdown-Proben validiert werden.
• Der Antikörper reagiert mit CAPG aus Mensch, Maus und Ratte. Bei anderen Spezies sollte vor der experimentellen Verwendung die Homologie der Zielsequenz geprüft werden.
• Für den ELISA sollten rekombinantes CAPG oder Zelllysate aus Makrophagenzelllinien verwendet werden, um die Bedingungen für Beschichtung und Detektion zu optimieren.
• Da CAPG zwischen Zellkern und Zytoplasma pendelt und in Membrankräuselungen lokalisiert ist, kann bei einer Anpassung für ICC eine subzelluläre Fraktionierung oder Immunfluoreszenz mit geeigneten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokollen untersucht werden.

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