BRD3-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q15059

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von BRD3

• BRD3 (bromodomänenhaltiges Protein 3) ist ein Mitglied der Bromodomänen- und Extraterminal-(BET)-Familie, auch bekannt als RING3-ähnliches Protein, und wird vom BRD3-Gen kodiert.
• Es fungiert als Chromatin-Leser, der spezifisch acetylierte Histone erkennt und bindet und dadurch die Genexpression sowie die Chromatinstruktur reguliert. Zugehörige Referenzen: PMID:18406326, PMID:22464331, PMID:27105114
• Es rekrutiert Transkriptionsfaktoren und Koaktivatoren zu Genpromotoren und erleichtert dadurch die transkriptionelle Elongation durch die RNA-Polymerase II. Zugehörige Referenzen: PMID:29567837, PMID:32895492
• Bindet in vitro an acetylierte Lysinreste der Histone H2A, H2B, H3 und H4. Zugehörige Referenzen: PMID:18406326
• Ist an der Endodermdifferenzierung beteiligt, indem es bei der Bindung an die lncRNA DIGIT eine Flüssig-Flüssig-Phasentrennung durchläuft, wodurch die Bindung an H3K18ac verstärkt und die Expression von Endodermgenen induziert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:32895492
• Lokalisiert sich im Zellkern und assoziiert mit Chromosomen.
• Wird ubiquitär in verschiedenen Geweben exprimiert.
• Wird posttranslational durch Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung modifiziert; enthält zwei Bromodomänen und eine Coiled-Coil-Region.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 150–305 und schließt die C-terminale Region der Bromodomäne 1 sowie den Linker zur Bromodomäne 2 ein. Dieses Design kann eine Reaktivität sowohl gegenüber BRD3-Isoformen voller Länge als auch gegenüber verkürzten Isoformen verleihen.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 80 kDa erwartet; validieren Sie den Nachweis in Ihrem spezifischen Probensystem und ziehen Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. HeLa- und HEK293T-Lysate) sowie geeignete Proteinmengen (z. B. 20–30 µg Gesamtprotein) in Betracht.
• Bei der Paraffin-Immunhistochemie (IHC-P) werden Methoden zur Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) sowie die Optimierung der Konzentration des Primärantikörpers und der Inkubationsbedingungen empfohlen; validieren Sie den Antikörper an Geweben mit bekannter BRD3-Expression.
• Für ELISA kann der Antikörper entweder als Fang- oder als Detektionsreagenz verwendet werden; optimale Beschichtungs- und Detektionskonzentrationen sollten experimentell bestimmt werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit humanem und Ratten-BRD3 wurde festgestellt; die Reaktivität mit anderen Spezies sollte jeweils einzeln getestet werden.

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