Biotin-Ratte-anti-Maus CD3 monoklonaler Antikörper für FC - P04235 / P22646

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der CD3-Delta- und -Epsilon-Kette

• CD3-Delta (P04235) und -Epsilon (P22646) sind essentielle Untereinheiten des T-Zell-Rezeptor(TCR)-CD3-Komplexes auf T-Lymphozyten und spielen eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität, indem sie Aktivierungssignale bei der Antigenerkennung übertragen.
• Die zytoplasmatischen Domänen der CD3-Ketten enthalten immunrezeptor-tyrosinbasierte Aktivierungsmotive (ITAMs), die nach Bindung des TCR durch die Src-Familienkinasen LCK und FYN phosphoryliert werden und damit nachgeschaltete Signalkaskaden einleiten.
• CD3-Delta ist entscheidend für die Thymozyten-Differenzierung: Es erleichtert die korrekte intrazelluläre Zusammenbau und Oberflächenexpression des TCR-CD3-Komplexes, und sein Fehlen stört die T-Zell-Entwicklung (PubMed:10935641). Verwandte Referenzen: PMID:10935641
• CD3-Delta interagiert mit den CD4- und CD8-Korezeptoren und stellt so eine funktionelle Verbindung zwischen dem TCR und diesen Korezeptoren her, die für die Aktivierung und positive Selektion von CD4+- oder CD8+-T-Zellen erforderlich ist.
• Sowohl CD3-Delta als auch -Epsilon sind Single-Pass-Typ-I-Membranproteine mit extrazellulären, transmembranen und zytoplasmatischen Regionen; sie werden auf der Plasmamembran von Thymozyten und reifen T-Zellen exprimiert.
• Diese Proteine werden posttranslational durch Glykosylierung und Phosphorylierung modifiziert und enthalten konservierte Disulfidbrücken, die ihre Struktur stabilisieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Führen Sie bei der Durchflusszytometrie eine Titrationsreihe des biotinylierten Antikörpers durch (z. B. 0,1–5 µg/mL), um die optimale Färbekonzentration für Ihre Zellpopulation zu ermitteln.
• Verwenden Sie ein geeignetes Avidin/Streptavidin-Fluorophor-Konjugat zur Detektion und schließen Sie ein isotypkontrolliertes Biotin-Ratten-IgG ein, um unspezifische Bindungen zu bewerten.
• Für die Oberflächenfärbung von lebenden Maus-T-Zellen sollten Sie einen kurzen Blockierungsschritt mit einem Fc-Rezeptor-Blocker in Betracht ziehen, um den Hintergrund zu reduzieren, und die Daten kurz nach der Färbung erfassen, um die Vitalität zu erhalten.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Mausstamm und Gewebekontext, da die CD3-Expression zwischen T-Zell-Subsets und Aktivierungszuständen variieren kann.

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