Biotin Kaninchen anti-Maus IgM monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01872

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Immunoglobulin heavy constant mu (IgM)

• Immunoglobulin heavy constant mu (IgM) ist die konstante Region der mu-schweren Kette, die die antigenbindenden Arme von IgM-Antikörpern bildet. Es wird vom Ighm-Gen im Lokus der schweren Immunglobulinkette kodiert.
• Sekretiertes IgM (sIgM) multimerisiert überwiegend zu Pentameren, gelegentlich zu Hexameren, was eine hochavid Bindung an Antigene ermöglicht. Sowohl natürliches (polyreaktives) als auch immunogenes (antigenspezifisches) sIgM sind essenziell für effektive humorale Antworten und vermitteln die Pathogenerkennung und -clearance über Fc-Rezeptoren (z. B. FCMR) sowie Komplementaktivierung (C1q klassischer Weg). Verwandte Referenzen: PMID:10899913, PMID:11062505, PMID:28135254, PMID:34788614
• Membrangebundenes IgM dient als Antigenrezeptorkomponente des B-Zellrezeptor(BCR)-Komplexes, es liefert konstitutive tonische Signale für das Überleben von B-Zellen und vermittelt prä-BCR-Signale, die die B-Zellentwicklung und allelische Exklusion regulieren.
• IgM kommt sowohl sezerniert als auch auf der Zellmembran vor. sIgM wird über PIGR durch das Mukosaepithel transportiert für die mukosale Immunität, während membrangebundenes IgM auf B-Zellen verankert ist.
• Wird spezifisch in B-Linienzellen exprimiert: B-Zellvorläufer im Knochenmark sowie reife B-1- und B-2-Zellen.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und interkettige Disulfidbindungen, die für die Polymerisation und strukturelle Stabilität essenziell sind. Alternatives Spleißen erzeugt sezernierte und membrangebundene Isoformen, das Protein enthält Immunglobulin-ähnliche Domänen, eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser biotin-konjugierte Antikörper detektiert Maus IgM in der Durchflusszytometrie. Verwenden Sie ein Streptavidin-Fluorophor-Sekundärreagenz zur Signalamplifizierung. Erwägen Sie eine Titration sowohl des Antikörpers als auch des Streptavidin-Konjugats für einen optimalen Färbeindex.
• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 105-454 von Maus IgM (konstante Region) und ermöglicht die Erkennung sowohl sezernierter als auch membrangebundener Formen. Für die Oberflächenfärbung von B-Zellen verwenden Sie nach Möglichkeit lebende, unfixierte Zellen; Fixierung kann die Epitopzugänglichkeit verändern.
• Fügen Sie geeignete Isotypkontrollen und Fc-Block hinzu, um unspezifische Bindung zu minimieren. Kreuzreaktivität mit anderen Maus-Immunglobulinklassen wurde nicht berichtet, aber eine Validierung im jeweiligen Proben system wird empfohlen.
• Für intrazelluläre Färbung von IgM ist Permeabilisierung erforderlich; validieren Sie Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle für Ihren spezifischen Zelltyp, um Epitope zu erhalten.

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