Biotin Rabbit anti-Mouse CD8a Monoclonal Antibody for FC - P01731

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD8a-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität: CD8a (T-Zell-Oberflächenglykoprotein CD8-Alpha-Kette, auch bekannt als Lyt-2) ist ein 27 kDa Typ-I-Transmembranglykoprotein, das durch das Cd8a-Gen bei Mäusen kodiert wird und eine Schlüsselkomponente der Immunerkennung darstellt.
• Korezeptorfunktion: In T-Zellen fungiert CD8a als Korezeptor für MHC-Klasse-I:Peptid-Komplexe und bindet gleichzeitig an den T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC-Klasse-I auf antigenpräsentierenden Zellen (APCs).
• Signalvermittler: CD8a rekrutiert die Src-Kinase LCK in den TCR-CD3-Komplex und leitet intrazelluläre Signalkaskaden ein, die die Lymphokinproduktion, Motilität, Adhäsion und die Aktivierung zytotoxischer T-Lymphozyten (CTLs) antreiben.
• CTL- und NK-Rollen: Dieser Mechanismus ermöglicht es CTLs, infizierte und Tumorzellen zu erkennen und zu beseitigen. In NK-Zellen bieten CD8A-Homodimer einen Überlebensmechanismus, der die Konjugation und Lyse mehrerer Zielzellen erleichtert.
• Differenzierung von Gedächtnis-T-Zellen: CD8A-Homodimer-Moleküle fördern das Überleben und die Differenzierung aktivierter Lymphozyten zu CD8+-Gedächtnis-T-Zellen.
• Posttranslationale Modifikationen: Das Protein enthält eine Disulfidbrücke, N-verknüpfte Glykosylierung und Palmitoylierungsstellen, die die Membranlokalisierung und Stabilität beeinflussen.
• Subzelluläre Lokalisierung: CD8a ist an der Zellmembran lokalisiert (Transmembranprotein mit einem Durchgang), wobei die extrazelluläre Domäne für die Ligandenerkennung verantwortlich ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 28–196) deckt die extrazelluläre Region von Maus-CD8a ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich ein exponiertes Epitop erkennt, das für die Durchflusszytometrie unter nicht denaturierenden Bedingungen geeignet ist.
• Für die FC wird eine Standard-Titration des biotinylierten Antikörpers empfohlen, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren; verwenden Sie ein Streptavidin-konjugiertes Fluorophor zur Detektion.
• Maus-CD8a wird überwiegend auf zytotoxischen T-Zellen und einer Teilmenge der NK-Zellen exprimiert; validieren Sie den Antikörper in relevanten Milzzellen- oder Lymphknotenzell-Suspensionen.
• Berücksichtigen Sie, dass alternatives Spleißen Isoformen erzeugen kann; bestätigen Sie bei Bedarf die Erkennung Ihrer Zielisoform.

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