Biotin Kaninchen anti-Human/Affe CD14 Monoklonaler Antikörper für FC - P08571

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD14-Funktion und -Lokalisierung

• Das Monozyten-Differenzierungsantigen CD14, auch bekannt als My23-Antigen oder myeloidezellspezifisches leucinreiches Glykoprotein, wird auf Monozyten, Makrophagen und schwach auf Granulozyten exprimiert.
• CD14 fungiert als Korezeptor für bakterielles Lipopolysaccharid (LPS), arbeitet mit LBP zusammen, um monomeres LPS an den LY96/TLR4-Komplex zu übergeben und vermittelt so angeborene Immunreaktionen. Verwandte Referenzen: PMID:1698311 PMID:23264655 PMID:20133493 PMID:22265692
• Nach LPS-Bindung löst CD14 eine MyD88/TIRAP/TRAF6-abhängige Signalgebung aus, was zur Aktivierung von NF-κB, Zytokinsekretion und Entzündungsreaktion führt. Verwandte Referenzen: PMID:8612135
• CD14 fungiert auch als Korezeptor für TLR2:TLR6- und TLR2:TLR1-Heterodimere als Reaktion auf diacylierte bzw. triacylierte Lipopeptide; diese Komplexe signalisieren von der Zelloberfläche und werden anschließend über einen lipidraft-abhängigen Weg an den Golgi-Apparat geleitet. Verwandte Referenzen: PMID:16880211
• Bindet elektronegatives LDL (LDL(-)) und vermittelt die durch LDL(-) induzierte Freisetzung von Zytokinen. Verwandte Referenzen: PMID:23880187
• Der subzelluläre Ort umfasst die Zellmembran, die sezernierte Form, Membran-Rafts und den Golgi-Apparat.
• Gewebsspezifität: auf Makrophagen nachgewiesen (auf Proteinebene), stark exprimiert auf Monozyten, schwach auf Granulozyten und auf den meisten Gewebemakrophagen. Verwandte Referenzen: PMID:1698311
• Strukturmerkmale: enthält leucinreiche Wiederholungen, ist ein GPI-verankertes Glykoprotein mit einem Signalpeptid und hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 40 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Verwenden Sie den biotinylierten Antikörper für den direkten Nachweis von Oberflächen-CD14 auf menschlichen oder Cynomolgus-Affen-Leukozyten mittels Durchflusszytometrie; sorgen Sie für eine ausreichende FcR-Blockierung, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Validieren Sie die Färbemuster unter Verwendung geeigneter positiver (z. B. Monozyten) und negativer (z. B. Lymphozyten) Zellpopulationen; berücksichtigen Sie Isotypkontrollen.
• Das Biotin-Label ermöglicht eine flexible Detektion mit fluoreszenten Streptavidin-Konjugaten; titrieren Sie das Streptavidin-Konjugat, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Für den intrazellulären Nachweis von CD14 im Golgi-Apparat oder im sekretorischen Weg ist ein Permeabilisierungsschritt erforderlich; beachten Sie, dass die Hauptanwendung die Oberflächenfärbung ist.
• Lagern Sie den Antikörper unter den empfohlenen kühlen Bedingungen (Versand im Eisbeutel) und schützen Sie ihn vor längerer Lichteinwirkung, um die Stabilität des Konjugats zu erhalten.

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