Biotin-markierte Anti-Maus CD117/c-Kit monoklonale Antikörper für Durchflusszytometrie – P05532

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD117/c-Kit

• Der Mastzell-/Stammzell-Wachstumsfaktor-Rezeptor Kit (CD117/c-Kit) ist eine transmembrane Tyrosin-Protein-Kinase des Typs III, die vom Proto-Onkogen Kit kodiert wird und als Rezeptor für das Zytokin KITLG/SCF dient.
• Nach Ligandenbindung aktiviert Kit mehrere nachgeschaltete Signalwege, darunter die PI3K/AKT-, RAS/MAPK- und JAK/STAT-Kaskaden, um das Überleben, die Proliferation und die Differenzierung von Zellen zu regulieren.
• Kit spielt eine wesentliche Rolle bei der Hämatopoese, der Erhaltung von Stammzellen, der Gametogenese, der Entwicklung, Migration und Funktion von Mastzellen sowie der Melanogenese.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Gewebsverteilungen: Isoform 1 ist weit verbreitet exprimiert, während Isoform 3 in hämatopoetischen Stammzellen angereichert ist.
• Subzellulär ist Kit hauptsächlich auf der Zellmembran lokalisiert, unterliegt aber nach Aktivierung der Internalisierung und zytoplasmatischen Lokalisation.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und ligandabhängige Phosphorylierung an wichtigen Tyrosinresten, die für die Kinaseaktivität und die Signalausbreitung kritisch sind.
• Als Proto-Onkogen sind aktivierende Mutationen und dysregulierte Expression von KIT an verschiedenen Malignomen beteiligt, was seine Bedeutung als therapeutisches Ziel unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 25–523) von Maus-CD117/c-Kit ab, sodass der Antikörper für den Nachweis oberflächenexprimierter Rezeptoren in der lebendzellbasierten Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Für die Durchflusszytometrie kombinieren Sie diesen biotinylierten Primärantikörper mit einem Fluorophor-konjugierten Streptavidin-Sekundärreagenz; titrieren Sie beide, um den optimalen Färbeindex für Ihre spezifische Zellart zu erreichen.
• Verwenden Sie geeignete Kontrollen wie isotypangepasste biotinylierte Antikörper und falls verfügbar Zellen von Kit-Knockout-Mäusen oder eine Blockierung mit rekombinantem KITLG/SCF, um die Spezifität zu bestätigen.
• Erwägen Sie bei Bedarf die Prüfung der Kreuzreaktivität mit menschlichen oder anderen Spezien, beachten Sie aber, dass dieser Antikörper nachweislich mit Maus reagiert; die Validierung in anderen Spezien liegt in der Verantwortung des Anwenders.
• Obwohl nicht aufgeführt, kann der Antikörper in anderen Anwendungen wie Immunhistochemie oder Immunpräzipitation funktionieren; die Leistung sollte im entsprechenden Probensystem empirisch validiert werden.

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