Biotin Anti-CD4 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01730

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD4

• CD4 ist ein Glykoprotein an der Oberfläche von T-Zellen (auch bekannt als T4/Leu-3), das vom CD4-Gen kodiert wird und zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Es spielt eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität.
• Als Korezeptor bindet CD4 an MHC-Klasse-II-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen und interagiert mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR), um die Src-Kinase LCK zu rekrutieren. Dies initiiert intrazelluläre Signalkaskaden, die die Aktivierung von T-Helferzellen, die Produktion von Lymphokinen, Adhäsion und Motilität fördern.
• CD4 ist an der Entwicklung von T-Helferzellen im Thymus beteiligt und löst die Differenzierung von Monozyten zu reifen, funktionsfähigen Makrophagen aus, was seine breitere Rolle bei der Reifung von Immunzellen unterstreicht.
• Es handelt sich um ein integrales Membranglykoprotein, das an der Zellmembran lokalisiert ist, mit umfangreichen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Disulfidbindungen, Glykosylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung.
• CD4 wird stark in T-Helferzellen exprimiert und dient als definierender Marker für diese Untergruppe; es ist auch auf anderen Immunzellen wie Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen vorhanden.
• CD4 ist der primäre Rezeptor für das Humane Immunschwächevirus-1 (HIV-1) (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026) und das Humane Herpesvirus-7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Das HIV-1 Vpu-Protein vermittelt die Herunterregulierung von CD4 (PubMed:17346169). Verwandte Referenzen: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Die Biotin-Markierung ermöglicht den direkten Nachweis ohne sekundäre Antikörper; erwägen Sie die Verwendung von Fluorophor-konjugiertem Streptavidin für die Durchflusszytometrie (FC), um das Signal zu verstärken.
• Dieser Antikörper wurde gegen rekombinantes humanes CD4-Protein hergestellt; eine Kreuzreaktivität mit Cynomolgus-Affen wurde beobachtet, jedoch wird aufgrund potenzieller Sequenzunterschiede eine Validierung im entsprechenden Probensystem empfohlen.
• Für die FC führen Sie eine Antikörper-Titration durch, um die optimale Konzentration zu bestimmen, die das beste Signal-Rausch-Verhältnis ergibt, und schließen Sie geeignete Isotypkontrollen ein.
• Beachten Sie als von Kaninchen stammender monoklonaler Antikörper potenzielle Fc-Rezeptor-Wechselwirkungen bei der Färbung von humanen myeloischen Zellen; Blockierungsschritte können in Betracht gezogen werden.
• CD4 ist ein Zelloberflächenprotein; für intrazelluläre Färbung optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten.

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