ATF6 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18850

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATF6

• ATF6 ist eine Transkriptionsfaktor-Vorstufe, die in der Membran des Endoplasmatischen Retikulums (ER) eingebettet ist. ER-Stress löst seine proteolytische Prozessierung aus, wodurch das aktive N-terminale Fragment freigesetzt wird, das in den Zellkern wandert, um die Entfaltete-Protein-Antwort (UPR) zu initiieren. Verwandte Referenzen: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464
• Prozessiertes ATF6 bindet als Heterodimer mit NF-Y an ER-Stress-Responsivelemente (ERSE, 5'-CCAAT-N₉-CCAC[GA]-3' und ERSE II, 5'-ATTGG-N-CCACG-3') und aktiviert dabei UPR-Zielgene. Verwandte Referenzen: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:11163209
• ATF6 kann auch die Serum-Response-Faktor-vermittelte Transkription regulieren und spielt eine Rolle bei der Entwicklung der retinale Fovea und der Zapfenfunktion. Verwandte Referenzen: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:26029869
• Subzelluläre Lokalisation: Die Vorstufe befindet sich in den Membranen von ER und Golgi-Apparat; nach der Prozessierung lokalisiert die Transkriptionsfaktordomäne im Zellkern.
• ATF6 wird ubiquitäer in allen menschlichen Geweben exprimiert.
• Die Vorstufe ist ein N-verknüpftes Glykoprotein und kann durch Ubiquitinierung modifiziert werden. Das Protein ist ein einpassiger Typ-II-Membranprotein (Signal-Anker), wobei sein N-Terminus zum Zytoplasma und sein C-Terminus zum ER-Lumen weist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid innerhalb der Aminosäuren 600–670 von humanem ATF6 (NP_031374.2), lokalisiert in der C-terminalen Lumendomäne. Diese Region ist in der vollständigen Vorstufe (~75 kDa) vorhanden. Der Nachweis der gespaltenen Kernform (~50 kDa) kann je nach Zugänglichkeit des Epitops variieren; validieren Sie in geeigneten ER-Stress-Modellen.
• Für Western Blot ist eine Bande nahe 75 kDa für die Vorstufe zu erwarten. Behandeln Sie Zellen mit ER-Stress-Induktoren (z. B. Tunicamycin, Thapsigargin), um die Prozessierung und nukleare Translokation zu beobachten.
• Für IHC-P empfehlen wir Antigen-Retrieval mit Citrat- oder EDTA-Puffer und die Bestätigung der Signal-Spezifität mit ausreichenden Kontrollen.
• Bei IF/ICC zeigt ATF6 unter Basalbedingungen ein retikuläres ER/Golgi-Muster und verteilt sich nach Stressinduktion in den Zellkern; verwenden Sie geeignete Fixierung und Permeabilisierung.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; optimieren Sie Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen.

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