ATF1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P18846

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATF-1 Funktion und Lokalisierung

• ATF-1 (Activating Transcription Factor 1) ist ein cAMP-abhängiger Transkriptionsfaktor, der vom ATF1-Gen kodiert wird und zur CREB/ATF-Familie der basischen Leucin-Zipper (bZIP) Transkriptionsfaktoren gehört.
• Er bindet an das cAMP-Response-Element (CRE; Konsensus 5'-GTGACGT[AC][AG]-3'), das in vielen viralen und zellulären Promotoren gefunden wird, sowie an das Tax-Responsive-Element (TRE) von HTLV-I.
• ATF-1 vermittelt die durch Proteinkinase A (PKA) induzierte Stimulation von CRE-Reportergenen und verknüpft die cAMP-Signalisierung mit der Genexpression.
• Er wirkt als transkriptioneller Repressor für antioxidative Detoxifikationsgene wie FTH1, was seine Beteiligung an Reaktionen auf oxidativen Stress impliziert.
• ATF-1 löst Zellproliferation und Transformation aus und ist an chromosomalen Rearrangements bei Malignomen beteiligt (z. B. EWS-ATF1- und FUS/ATF-1-Fusionen).
• Das Protein ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was seiner Rolle als Transkriptionsfaktor entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (Phosphoprotein) und Ubiquitinierung (Ubl-Konjugation), und es unterliegt alternatives Spleißen.
• Uniprot-Schlüsselwörter heben seine Funktionen hervor: DNA-Bindung, Aktivator, Transkriptionsregulation und seine Beteiligung an chromosomalen Rearrangements.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen war ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-210 von humanem ATF1 abdeckt, einschließlich der N-terminalen Region. Diese Region ist gut konserviert und kann für die Detektion des Gesamt-ATF-1-Proteins geeignet sein, jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit anderen eng verwandten Familienmitgliedern (wie CREB) durch Sequenzalignment bewertet werden.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 29 kDa; erwägen Sie die Verwendung geeigneter Gelkonzentrationen und Ladekontrollen. Validieren Sie die Spezifität unter Verwendung relevanter Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293) und Mausgewebe.
• Für die Immunpräzipitation (IP) stellen Sie die Stabilität des Antikörper-Antigen-Komplexes sicher; testen Sie verschiedene Lysepufferbedingungen, um die Proteinwechselwirkungen aufrechtzuerhalten.
• Im ELISA kann die Verwendung eines Peptid- oder Proteinstandards helfen, die ATF-1-Spiegel zu quantifizieren; überprüfen Sie die Linearität und Empfindlichkeit.

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