ASC/TMS1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF, IHC-P, ELISA - Q9ULZ3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ASC/TMS1

• ASC/TMS1 (apoptoseassoziiertes speckartiges Protein mit einer CARD-Domäne), auch bekannt als PYCARD, CARD5 oder TMS-1, ist ein 22 kDa großes Adapterprotein, das aus einer N-terminalen Pyrin-Domäne (PYD) und einer C-terminalen Caspaserekrutierungsdomäne (CARD) besteht.
• Es fungiert als zentrales Inflammasom-Gerüst, das NLR-Sensoren (NLRP1, NLRP3, NLRC4) oder AIM2 mit Pro-Caspase-1 verbindet und dadurch die Caspase-1-Aktivierung, die Reifung von IL-1β und IL-18 sowie den pyroptotischen Zelltod antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957, PMID:24630722
• ASC vermittelt Apoptose durch Förderung der Caspase-8-abhängigen Spaltung von BID, der mitochondrialen BAX-Translokation und der anschließenden Aktivierung von Caspase-9 und -3, oft unabhängig von FADD. Verwandte Referenzen: PMID:11103777, PMID:12646168, PMID:14730312, PMID:16964285
• Im Zellkern kann ASC den NF-κB-Signalweg durch Hemmung des IKK-Komplexes und Konkurrenz mit RIPK2 modulieren und dadurch die Entzündungsgenexpression feinabstimmen. Verwandte Referenzen: PMID:12486103, PMID:16585594
• ASC lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten, darunter Zytoplasma, Inflammasom-Specks, Endoplasmatisches Retikulum, Mitochondrien, Zellkern und Golgi-Apparat, was mit seinen vielseitigen Rollen bei Immunsignalisierung und Apoptose übereinstimmt.
• Es wird weithin bei geringer Expression gebildet, mit höherer Häufigkeit in Leukozyten des peripheren Blutes, Lunge, Dünndarm, Milz, Thymus und Dickdarm. Die Expression wird oft durch Promotormethylierung in Tumoren stillgelegt, was mit der bekannten Tumorsuppressoraktivität übereinstimmt. Verwandte Referenzen: PMID:23229815
• ASC unterliegt regulatorischen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Ubiquitinierung und Phosphorylierung, die die Inflammasomassemblierung und Signalstärke kontrollieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen deckt die zentrale Region (AS 50–195) zwischen der PYD- und der CARD-Domäne ab, was eine Reaktivität sowohl gegen volllängeres ASC als auch gegen Spleißvarianten vermitteln kann; es wird empfohlen, die Spezifität durch Knockdown- oder Knockout-Kontrollen zu bestätigen.
• Im Western Blot ist eine dominante Bande bei etwa 22 kDa zu erwarten; verwenden Sie positives Kontrolllysat aus THP-1-Zellen oder mononukleären Zellen des menschlichen peripheren Blutes und fügen Sie Proteaseinhibitoren hinzu, um Abbau zu minimieren.
• Für Immunfluoreszenz und ICC sind speckartige Aggregate ein Kennzeichen aktivierter Inflammasome; eine Co-Färbung mit Antikörpern gegen NLRP3, AIM2 oder Caspase-1 kann die Inflammasombildung bestätigen. Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten für den Zelltyp und den Aktivierungszustand optimiert werden.
• Bei IHC-P (paraffineingebettete Gewebe) werden Antigenrettung in Citratpuffer (pH 6,0) und Blockierung endogener Peroxidasen empfohlen; Gewebe mit bekannter Entzündung (z. B. entzündetes Kolon, Mandeln) eignen sich als geeignete Positivkontrollen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Kombination dieses polyclonalen Antikörpers mit einem einfangenden monoklonalen Antikörper das Signal verbessern; validieren Sie Linearität und Spezifität des Assays mit rekombinantem ASC-Protein.
• Dieser Antikörper erkennt ASC aus Mensch, Maus und Ratte; die Kreuzreaktivität kann jedoch je nach Assayformat variieren, daher wird empfohlen, eine speziesbezogene Validierung durchzuführen.

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