APOA1 Kaninchen-pAk für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02647

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: APOA1-Funktion und -Lokalisierung

• Apolipoprotein A-I (APOA1) ist die Hauptproteinkomponente des High-Density-Lipoproteins (HDL) im Plasma und findet sich auch in Chylomikronen.
• Es spielt eine zentrale Rolle beim reversen Cholesterintransport, indem es den Cholesterinabfluss aus Geweben fördert und als Kofaktor für Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) wirkt, was die Cholesterinveresterung und -clearance erleichtert.
• Als Teil des SPAP-Komplexes (seminal plasma sperm-activating protein) trägt APOA1 zur Aktivierung der Spermienmotilität bei.
• APOA1 ist ein sezerniertes Protein, das hauptsächlich in der Leber und im Dünndarm synthetisiert wird und im Plasma als Bestandteil von HDL-Partikeln zirkuliert.
• Das Protein unterliegt oxidativen Modifikationen an Met-110 und Met-136; diese oxidierten Formen sind bei Personen mit höherem Risiko für koronare Herzkrankheiten erhöht, einschließlich Trägern des eNOSa/b-Genotyps und Rauchern, und sind in Aortalesionen mit zunehmender Erkrankungsschwere angereichert.
• APOA1 gehört zu einer Familie von Apolipoproteinen, die am Lipidtransport und -stoffwechsel beteiligt sind, mit Anmerkungen, die es mit dem Cholesterinstoffwechsel, Steroidstoffwechsel und Arteriosklerose verknüpfen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykierung, Phosphorylierung, Palmitoylierung und Nitrierung, die seine Funktion und pathologische Rollen bei Amyloidose und Neuropathie modulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der reifen Proteinsequenz (Aminosäuren 25-267) und deckt einen großen Teil von APOA1 ab; diese Region ist zwischen Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die berichtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blots wird vorhergesagt, dass APOA1 bei etwa 28 kDa wandert, aber posttranslationale Modifikationen und die Assoziation mit HDL-Partikeln können Verschiebungen verursachen; validieren Sie die Bandengröße in Ihrem Probensystem mit geeigneten Positivkontrollen (z. B. humanes Plasma, Leberlysate).
• In der Immunhistochemie (IHC-P) ist APOA1 primär im extrazellulären Raum und im Zytoplasma von Hepatozyten und Enterozyten lokalisiert; optimieren Sie die Antigen-Retrieval und erwägen Sie eine Co-Färbung mit HDL-Markern, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) beachten Sie, dass APOA1 sezerniert wird; intrazelluläre Färbung kann neu synthetisiertes Protein im endoplasmatischen Retikulum/Golgi-Apparat widerspiegeln; verwenden Sie serumfreie Bedingungen oder Pulse-Chase, um den Nachweis zu verbessern.
• Der Antikörper wurde für ELISA validiert; aufgrund seiner polyklonalen Natur kann er mehrere Epitope erkennen und bietet potenziell eine erhöhte Empfindlichkeit in Sandwich-ELISA-Setups, wenn er mit einem geeigneten Fangantikörper gepaart wird.
• Schließen Sie immer Kontrollen relevanter Spezies (Mensch, Maus, Ratte) und Gewebe (Leber, Dünndarm, Plasma) ein, um die experimentelle Spezifität zu bestätigen.

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