APC/Cyanine7 Kaninchen anti-Maus CD8a monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01731

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD8a-Funktion und -Lokalisierung

• Das T-Zell-Oberflächenglykoprotein CD8-Alpha-Kette (CD8a) ist ein integrales Membranprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle dient und eine wesentliche Rolle bei der adaptiven Immunität und der Erkennung intrazellulärer Pathogene spielt.
• CD8a interagiert gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) und dem MHC-Klasse-I-Peptid-Komplex auf antigenpräsentierenden Zellen, rekrutiert die Src-Kinase LCK, um Signalkaskaden einzuleiten, die zur Aktivierung zytotoxischer T-Zellen, Zytokinproduktion und zum Absterben der Zielzellen führen.
• In natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) fördern CD8A-Homodimere die Konjugatbildung und Lyse mehrerer Zielzellen und unterstützen die Differenzierung aktivierter Lymphozyten zu Gedächtnis-CD8+-T-Zellen.
• Das Protein wird über eine einzelne Transmembrandomäne an der Zellmembran lokalisiert und durch Palmitoylierung, Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung innerhalb seiner immunglobulinähnlichen Domäne modifiziert.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein wird unter Schlagworte wie adaptive Immunität, Disulfidbrücke, Glykoprotein, Palmitat und Signal klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Färbebedingungen zu ermitteln; ein Anfangsverdünnungsbereich von 1:100–1:400 ist typisch für Oberflächenantigene.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und eine Lebend/Tot-Unterscheidung, um ein genaues Gating sicherzustellen; Mäuse-Milzzellen oder Thymozyten dienen als ideale positive Kontrollgewebe für die CD8a-Expression.
• APC/Cyanine7 ist ein Tandem-Fluorophor; minimieren Sie die Lichtexposition und beachten Sie, dass Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte die Stabilität des Tandemfarbstoffs und die Fluoreszenzintensität verändern können.
• Validieren Sie die Antikörperbindung unter Ihren experimentellen Bedingungen, indem Sie die Färbemuster mit bekannten biologischen positiven und negativen Populationen vergleichen.

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