APC/Cyanine7 Kaninchen anti-Mensch/Affe CD8a Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01732

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8a

• T-Zell-Oberflächenglykoprotein CD8-alpha-Kette (CD8A) ist ein integrales Membranglykoprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle fungiert. Es interagiert mit dem T-Zell-Rezeptor (TZR) und MHC I auf antigenpräsentierenden Zellen und rekrutiert die Src-Kinase LCK, um intrazelluläre Signalwege auszulösen, die für die T-Zell-Aktivierung und zytotoxische Antworten essenziell sind.
• CD8A kann entweder als disulfidverknüpftes Heterodimer mit CD8B oder als Homodimer vorliegen. Heterodimere sind typischerweise auf thymusabgeleiteten T-Zellen, während Homodimere auf NK-Zellen, Gedächtnis-T-Zellen, intraepithelialen Lymphozyten, Monozyten und dendritischen Zellen exprimiert werden.
• Dieser Korezeptormechanismus ermöglicht es zytotoxischen T-Lymphozyten (CTLs), infizierte oder Tumorzellen zu erkennen und zu eliminieren, und spielt eine zentrale Rolle bei der adaptiven Immunität gegen äußere und innere Bedrohungen.
• In NK-Zellen fördern CD8A-Homodimere das Überleben und erleichtern die Konjugation an multiple Zielzellen, wodurch die serielle Lyse verbessert wird.
• CD8A wird auf einer Untergruppe von natürlichen Killerzellen, Gedächtnis-T-Zellen und plasmazytoiden dendritischen Zellen exprimiert – letztere nach viraler Stimulation wie durch Herpes-simplex-Virus-1, was seine Rolle bei der frühen Immunverteidigung unterstreicht.
• Das Protein erfährt posttranslationale Modifikationen einschließlich Disulfidbindungsbildung, Glykosylierung und Palmitoylierung, die für die Membranlokalisation und Funktion kritisch sind. Alternatives Spleißen ergibt sowohl membrangebundene als auch sezernierte Isoformen.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Zellmembran und die extrazelluläre Sekretion; ein Signalpeptid steuert seine Synthese in den Sekretionsweg.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie ist eine typische Startverdünnung von 1:50 bis 1:200 oft wirksam; führen Sie eine Titration an dem entsprechenden Zelltyp durch, um die optimale Konzentration zu bestimmen.
• Verwenden Sie geeignete Kompensationskontrollen und schützen Sie den konjugierten Antikörper vor längerer Lichteinwirkung, um die Fluorophorstabilität zu erhalten.
• Färben Sie lebende Zellen in eiskaltem Färbepuffer ohne Permeabilisierung, da CD8a ein Zelloberflächenantigen ist.
• Fügen Sie eine Isotypkontrolle oder Kongenische-Marker-Färbung hinzu, um eine genaue Gating von CD8+-Populationen zu ermöglichen – insbesondere bei der Analyse von T-Zell-Subpopulationen oder NK-Zellen.
• Dieser Antikörper wurde validiert, um sowohl menschliches als auch cynomolgus Affen-CD8a zu erkennen. Nutzer bei Kreuzspeziess-Anwendungen sollten die Reaktivität in ihrem spezifischen experimentellen System bestätigen.

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