APC/Cyanine7 Kaninchen anti-Human EGFR Monoklonaler Antikörper für FC - P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: EGFR-Funktion und -Lokalisierung

• EGFR ist ein Rezeptor-Tyrosinkinase (RTK) der ErbB-Familie, auch bekannt als HER1 oder c-ErbB-1, kodiert durch das EGFR-Gen.
• Er bindet an Liganden der EGF-Familie (z. B. EGF, TGF-alpha, AREG, Epigen, Betacellulin, Epiregulin, HB-EGF), was die Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029
• Aktiviertes EGFR signalisiert über die RAS-RAF-MEK-ERK-, PI3K-AKT-, PLCgamma-PKC-, STATs- und NF-kappa-B-Kaskaden. Verwandte Referenzen: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:11116146
• Es phosphoryliert direkt RGS16 und MUC1 und verknüpft sie mit der GPCR-Signalisierung und Zelladhäsion. Verwandte Referenzen: PMID:11602604 PMID:11483589
• EGFR reguliert die Zellmigration positiv durch Interaktion mit CCDC88A/GIV. Verwandte Referenzen: PMID:20462955
• Eine alternative Isoform (Isoform 2) kann die EGF-Signalisierung antagonisieren.
• Er lokalisiert sich in der Zellmembran, dem ER, dem Golgi, dem Zellkern, dem Endosom und wird sezerniert. Ubiquitär exprimiert; Isoform 2 in Eierstockkrebsen.
• Das Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen (Glykosylierung, Phosphorylierung usw.) und fungiert als Eintrittsrezeptor für HCV.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 335-525) liegt innerhalb der extrazellulären Ligandenbindedomäne und ermöglicht die Detektion von EGFR auf der Zelloberfläche durch Durchflusszytometrie ohne Permeabilisierung.
• Führen Sie für die Durchflusszytometrie eine Antikörpertitration durch, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp zu ermitteln.
• Verwenden Sie einen geeigneten Isotyp-Kontrolle und eine Lebend/Tot-Unterscheidung, um ein spezifisches Signal zu gewährleisten.
• Da APC/Cyanine7 ein Tandem-Farbstoff ist, verwenden Sie geeignete Kompensationskontrollen in Mehrfarben-Panels; vermeiden Sie längere Lichteinwirkung und Fixierungsmittel, die die Stabilität des Fluorophors beeinträchtigen könnten.
• Validieren Sie die Färbespezifität unter Verwendung von EGFR-negativen Zelllinien oder Liganden-Wettbewerbsassays.

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