APC/Cyanine7 Kaninchen anti-Mensch CD56/NCAM1 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P13591

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NCAM1

• Das neuronale Zelladhäsionsmolekül 1 (NCAM1) ist ein Zelladhäsionsprotein der Immunglobulin-Superfamilie, gekennzeichnet durch immunglobulinähnliche Domänen und Fibronectin-Typ-III-Wiederholungen.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, einschließlich GPI-verankerter und transmembraner Varianten sowie einiger sezernierter Formen.
• NCAM1 vermittelt homophile und heterophile Zell-Zell-Adhäsion, die für die Neuron-Neuron-Adhäsion, die Faszikulation von Neuriten und das Neuritenwachstum essenziell ist.
• Es fungiert zudem als Wirtszellrezeptor für das Tollwutvirus und das Zika-Virus und erleichtert den viralen Eintritt.
• Das Protein befindet sich hauptsächlich an der Zellmembran, aber es gibt auch sezernierte Isoformen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung, Phosphorylierung, Disulfidbindungsbildung und GPI-Anker-Hinzufügung, die seine Struktur und Funktion beeinflussen.
• Die theoretische Molekülmasse des unverarbeiteten Präkurors beträgt ~94,6 kDa, aber die Glykosylierung erhöht das scheinbare Gewicht auf ~95 kDa und mehr.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen war ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 20-413 umfasst und die extrazelluläre Domäne von humanem NCAM1 darstellt. Dieses Design begünstigt die Erkennung von oberflächenexprimiertem CD56 in der Durchflusszytometrie.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie das APC/Cyanine7-Konjugat direkt; erwägen Sie eine Titration des Antikörpers, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren Zelltyp zu bestimmen.
• Validieren Sie den Antikörper in relevanten Proben systemen: CD56 wird in humanen natürlichen Killerzellen und Neuronensubpopulationen exprimiert, daher gehören zu geeigneten Positivkontrollen humane NK-Zelllinien oder periphere mononukleäre Blutzellen.
• Stellen Sie sicher, dass Ihr Durchflusszytometer mit einem passenden Laser und Filtersatz für die APC-Cy7-Detektion ausgestattet ist (Anregung ~633-650 nm, Emission ~780 nm).
• Da der Antikörper spezifisch für humanes CD56 ist, bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit Ihrer Zielspezies, wenn Sie mit nicht-humanen Proben arbeiten; Kreuzreaktivität wird nur für Mensch berichtet.
• Für optimale Leistung befolgen Sie Standardprotokolle für Oberflächenfärbung und verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen.

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