APC Kaninchen anti-Maus IL-17A monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (Intrazellulär) - Q62386

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL-17A-Funktion und -Lokalisierung

• Interleukin-17A (IL-17A), auch bekannt als CTLA-8, ist ein proinflammatorisches Zytokin, das zur IL-17-Familie gehört und ein charakteristischer Effektor von T-Helfer-17 (Th17)-Zellen ist. Es spielt eine zentrale Rolle bei der antimikrobiellen Abwehr des Wirts und der Gewebeintegrität. Verwandte Referenzen: PMID:18025225 PMID:19144317 PMID:26431948
• Signalisiert über den heterodimeren Rezeptor IL17RA-IL17RC, rekrutiert TRAF3IP2 und aktiviert TRAF6-abhängige NF-κB- und MAP-Kinase-Signalwege, um die Transkription von Zytokinen, Chemokinen, antimikrobiellen Peptiden und Matrixmetalloproteinasen zu steuern und so starke Entzündungsreaktionen zu orchestrieren. Verwandte Referenzen: PMID:16200068 PMID:17911633 PMID:19144317
• Induziert hauptsächlich die Aktivierung und Rekrutierung von Neutrophilen an Infektions- und Entzündungsorten; im Atemwegsepithel vermittelt es die Neutrophilen-Chemotaxis durch Induktion der CXCL1- und CXCL5-Chemokine. Verwandte Referenzen: PMID:18025225 PMID:27923703
• In sekundären lymphatischen Organen trägt IL-17A zur Bildung von Keimzentren bei, indem es die B-Zell-Chemotaxis zu CXCL12 und CXCL13 moduliert, die B-Zell-Retention, die somatische Hypermutation und die Plasmazelldifferenzierung verbessert. Verwandte Referenzen: PMID:18157131
• Fungiert als Effektor-Zytokin von Gamma-Delta-T-Zellen, iNKT-Zellen und Gruppe-3-angeborenen lymphoiden Zellen, fördert die frühe neutrophile Entzündung und die rasche bakterielle Clearance. Verwandte Referenzen: PMID:17372004 PMID:20364087 PMID:28709803
• Spielt eine direkte Rolle für die Integrität der epithelialen Barriere, indem es die Lokalisierung von Okkludin (OCLN) und die Biogenese der Tight Junctions nach akuter Verletzung reguliert; synergisiert mit IL-17F, um antimikrobielle β-Defensine (DEFB1, DEFB103A, DEFB104A) aus mukosalen Epithelzellen zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:26431948 PMID:19144317
• Trägt zur antiviralen Abwehr des Wirts bei: verstärkt die T-Zell-Zytotoxizität gegen das West-Nil-Virus, verbessert die B-Zell-Antworten bei Influenza-A-Virus (H5N1)-Infektionen und treibt die Differenzierung von B-1a-Zellen zur Produktion virusspezifischer IgM während der H1N1-Clearance an. Verwandte Referenzen: PMID:21946434 PMID:26735852 PMID:27795421
• Sekretiertes Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von ~17,5 kDa (Vorläufer) und einem Signalpeptid sowie einer Disulfidbrücke; wird vorwiegend von Th17-Zellen und in geringerem Maße von angeborenen lymphoiden Zellen, γδ-T-Zell-Subsets und iNKT-Zellen exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie stimulieren Sie Maus-T-Zellen oder relevante Zellpopulationen 4–6 Stunden vor der Färbung mit PMA/Ionomycin in Gegenwart eines Proteintransportinhibitors (z. B. Brefeldin A), um den IL-17A-Nachweis zu verbessern.
• Nach der Oberflächenfärbung fixieren und permeabilisieren Sie die Zellen mit einem geeigneten Fixierungs-/Permeabilisierungskit und verwenden Sie einen geeigneten Isotyp-Kontrolle-Antikörper sowie einen Viabilitätsfarbstoff, um unspezifische Bindungen und die Unterscheidung zwischen lebenden und toten Zellen zu überwachen.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Verdünnung für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Aktivierungsbedingungen zu ermitteln; Die Variabilität von Klon zu Klon kann die Bindungsaffinität beeinflussen.
• Validieren Sie die Spezifität in IL-17A-Knockout-Mausproben oder verwenden Sie gegebenenfalls ein blockierendes Peptid/Kontrollantigen.
• Berücksichtigen Sie, dass der Antikörper gegen die Aminosäuren 26–158 erhoben wurde, was die reife sezernierte Form umfasst, aber das Signalpeptid fehlt; Bestätigen Sie die Reaktivität im entsprechenden biologischen Kontext.

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