APC-Konjugierter Kaninchen-Anti-Maus-CD86 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P42082

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD86-Funktion und -Lokalisierung

• CD86, ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, fungiert als kostimulatorisches Molekül, das für die T-Lymphozyten-Aktivierung entscheidend ist. Es liefert das primäre Hilfssignal, das die MHC/TCR-Signalgebung in naiven T-Zellen durch Bindung an den CD28-Rezeptor verstärkt (By similarity).
• Es wirkt auch als Inhibitor der T-Zell-Aktivierung, indem es als Ligand für CTLA4 dient, einen Köderrezeptor, der die CD28-vermittelte T-Zell-Primierung blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:7504059, PMID:7513726
• CD86 spielt eine Rolle bei der Regulation der B-Zell-Funktion und der IgG1-Produktion; nach CD40-Engagement aktiviert es den NF-kappa-B-Signalweg über Phospholipase C und Proteinkinase C. Verwandte Referenzen: PMID:23241883
• Das Protein wird auf den Oberflächen von Antigen-präsentierenden Zellen exprimiert, was mit seiner Rolle bei der Bildung der Immunsynapse übereinstimmt.
• Es enthält eine Immunglobulin-Domäne, eine Transmembranregion und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Glykosylierung und Ubiquitinierung.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen von CD86.
• Subzellulär lokalisiert CD86 an der Zellmembran.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 24-245), die für den Nachweis von Oberflächen-CD86 an lebenden, unfixierten Zellen mittels Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Da der Antikörper ein extrazelluläres Epitop erkennt, kann er mit Anwendungen kompatibel sein, die die native Konformation erfordern, wie funktionelle Studien oder zellbasierter ELISA; eine Validierung im spezifischen Assay-System wird jedoch empfohlen.
• Für die Durchflusszytometrie geeignete Isotypenkontrollen verwenden und die Fc-Rezeptor-Blockade zur Minimierung unspezifischer Bindung in Betracht ziehen.
• Da CD86 auf Antigen-präsentierenden Zellen exprimiert wird, sollte die Probenvorbereitung die Anreicherung relevanter Zelltypen (z. B. dendritische Zellen, Makrophagen, B-Zellen) sicherstellen.

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