APC-Kaninchen-anti-Maus-CD366-(TIM-3)-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – Q8VIM0

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD366 (TIM-3)

• Das Homolog des zellulären Hepatitis-A-Virus-Rezeptors 2 (HAVCR2), auch bekannt als T-Zell-Immunglobulin- und Muzindomänen-enthaltendes Protein 3 (TIM-3) oder T-Zell-Membranprotein 3, ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen, und die kanonische Maussequenz weist ein berechnetes Molekulargewicht von etwa 31 kDa auf (beobachtet werden aufgrund der Glykosylierung 22 kDa).
• Es fungiert als immunmodulatorischer Rezeptor mit allgemein hemmenden Funktionen, unterdrückt durch T-Helferzellen des Typs 1 (Th1) vermittelte Autoimmun- und Alloimmunreaktionen und fördert die immunologische Toleranz (PubMed:14556006, PubMed:18006747). In CD8+-T-Zellen schwächt es die TCR-Signalübertragung ab, indem es die Promotoraktivitäten von NF-kappaB und NFAT blockiert und dadurch die IL-2-Sekretion reduziert (Ähnlichkeit). Verwandte Referenzen: PMID:14556006 PMID:18006747
• Es wurden jedoch auch kontextabhängige aktivierende Funktionen beschrieben, darunter die Verstärkung der TCR-Signalübertragung in T-Zellen über ZAP70, LCP2, LCK und FYN (PubMed:21807895) sowie die Steigerung von CD8+-T-Zell-Reaktionen während einer akuten Infektion (PubMed:24567532). Auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) wirkt es als Korezeptor und verstärkt die IFN-gamma-Produktion, kann jedoch abhängig von den Bedingungen auch die Zytotoxizität unterdrücken (PubMed:25337993). Verwandte Referenzen: PMID:21807895 PMID:24567532 PMID:25337993
• TIM-3 ist ein Rezeptor für LGALS9 (Galectin-9). Diese Wechselwirkung führt über die Phosphorylierung von HAVCR2 und die Dissoziation von BAG6 zur Unterdrückung von T-Zell-Reaktionen und zur Apoptose (PubMed:22863785). Darüber hinaus trägt TIM-3 zur angeborenen Immunität bei, indem es die IL-1β-Sekretion von Makrophagen stimuliert und nach Bindung an LGALS9 auf mit Mycobacterium tuberculosis infizierten Makrophagen das intrazelluläre Bakterienwachstum einschränkt (PubMed:20937702). Verwandte Referenzen: PMID:22863785 PMID:20937702
• Zusätzlich bindet TIM-3 calciumabhängig an Phosphatidylserin (PtSer) und vermittelt dadurch die Phagozytose apoptotischer Zellen durch dendritische Zellen (PubMed:20083673, PubMed:19224762). In tumorinfiltrierenden dendritischen Zellen unterdrückt es durch Interaktion mit HMGB1 die durch Nukleinsäuren vermittelten Reaktionen der angeborenen Immunität (PubMed:22842346). Verwandte Referenzen: PMID:20083673 PMID:19224762 PMID:22842346
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Plasmamembran, Zellkontakte und eine sezernierte Form. Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Disulfidbrücken, Glykosylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion und Signalwechselwirkungen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 20–191) und gewährleistet die Erkennung des nativen Rezeptors auf der Zelloberfläche, wodurch sich der Antikörper für die Durchflusszytometrie eignet.
• Erwägen Sie, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp zu bestimmen, da die TIM-3-Expressionsniveaus je nach Aktivierungsstatus variieren.
• Da TIM-3 auf aktivierten T-Zellen, Makrophagen, dendritischen Zellen, NK-Zellen und Mastzellen exprimiert wird, sollte der Antikörper im relevanten Probensystem validiert und geeignete Isotypkontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie einen Viabilitätsfarbstoff, um tote Zellen auszuschließen, da TIM-3 an Phosphatidylserin auf apoptotischen Zellen binden kann und dadurch möglicherweise eine unspezifische Färbung verursacht.

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