APC Kaninchen anti-Maus CD32 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (FC) - P08101

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD32-Funktion und -Lokalisierung

• Rezeptor II für die Fc-Region von Immunglobulin Gamma mit niedriger Affinität (FcγRIIB), auch bekannt als CD32, codiert durch das Fcgr2b-Gen bei der Maus. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen mit unterschiedlichen funktionellen Eigenschaften.
• Bindet mit niedriger Affinität an die Fc-Region von komplexierten Immunglobulinen Gamma und vermittelt Effektor- und Regulationsfunktionen wie die Phagozytose von Antigen-Antikörper-Komplexen und die Modulation der Antikörperproduktion durch B-Zellen.
• Die Isoformen IIB1 und IIB1' bilden Kappen (Caps), vermitteln aber keine Endozytose oder Phagozytose, während die Isoform IIB2 die Endozytose löslicher Immunkomplexe über clathrinbeschichtete Gruben vermitteln kann.
• Die Koaggregation mit B-Zell-Rezeptoren (BCR), T-Zell-Rezeptoren (TCR) oder Fc-Rezeptoren downreguliert die Aktivierung von B-Zellen, T-Zellen bzw. Mastzellen.
• Lokalisiert an der Zellmembran, auch im Zytoplasma gefunden, assoziiert mit dem Zytoskelett, und eine sezernierte Isoform (IIB3) wird von Makrophagen in das Serum freigesetzt.
• Weit verbreitet exprimiert in hämatopoetischen Zellen; Isoform IIB1 wird bevorzugt in der lymphoiden Linie exprimiert, IIB2 in der myeloischen Linie und IIB3 ist serumlöslich.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung, Disulfidbrücken sowie das Vorhandensein eines Signalpeptids und einer Transmembrandomäne; gehört zur Immunglobulin-Superfamilie.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Als monoklonaler Antikörper ist eine konsistente Charge-zu-Charge-Leistung zu erwarten. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu ermitteln.
• Für die Durchflusszytometrie sollten entsprechende Schritte zum Blockieren von Fc-Rezeptoren und Isotyp-Kontrollen eingeschlossen werden, um unspezifische Bindungen zu minimieren, insbesondere bei Zellen mit hoher Fc-Rezeptor-Expression.
• Das APC-Konjugat bietet eine starke Fluoreszenz, die für Multicolor-Panels geeignet ist; Stellen Sie sicher, dass geeignete Kompensationskontrollen enthalten sind, wenn es mit anderen Fluorophoren kombiniert wird.
• CD32-Isoformen werden unterschiedlich exprimiert; wenn eine isoformspezifische Detektion erforderlich ist, validieren Sie dies in Ihrem Modellsystem unter Verwendung von Literatur oder alternativen Methoden.
• Die Zelloberflächenfärbung mit diesem Antikörper kann eine Optimierung der Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für die kombinierte intrazelluläre Färbung erfordern.

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