APC-Konjugierter Kaninchen-Anti-Human/Maus PDGFRα/CD140a monoklonaler Antikörper für FC - P16234

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDGFRα-Funktion und -Lokalisation

• Der plättchen-abgeleitete Wachstumsfaktor-Rezeptor Alpha (PDGFRα) ist ein Tyrosinkinase-Rezeptor auf der Zelloberfläche, der PDGFA, PDGFB und PDGFC bindet und Signalkaskaden initiiert, die Zellproliferation, -überleben, Chemotaxis und Differenzierung regulieren. (UniProt: P16234)
• Der Rezeptor spielt eine wesentliche Rolle in der Embryonalentwicklung, einschließlich Skelettbildung, Schädelverschluss, Entwicklung der Magen-Darm-Schleimhaut und Bildung der Darmzotten, und ist für die Differenzierung von mesenchymalen Stammzellen aus dem Knochenmark erforderlich.
• PDGFRα wird vom PDGFRA-Gen kodiert und ist auch als CD140a, PDGFR2 und PDGFR-2 bekannt; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein enthält Immunglobulin-ähnliche Domänen in seiner extrazellulären Region.
• Liganden-induzierte Aktivierung führt zur Phosphorylierung von Downstream-Effektoren wie PIK3R1, PLCG1 und PTPN11 und fördert die Signalübertragung über die AKT1-, MAPK/ERK- und STAT-Pfade, wodurch vielfältige zelluläre Reaktionen moduliert werden.
• Subzellulär ist PDGFRα an der Zellmembran sowie am Golgi-Apparat und primären Zilium lokalisiert, was seine dynamischen Transport- und Signalrollen widerspiegelt.
• Der Rezeptor ist weit verbreitet exprimiert, mit Nachweis in Thrombozyten, Gehirn, Fibroblasten, glatter Muskulatur, Herz und Embryo, und kommt auch in primären und metastatischen Kolontumoren sowie normalem Kolongewebe vor.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung; das Protein wird als Proto-Onkogen klassifiziert und mit verschiedenen Krankheitsvarianten in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 24-524), was diesen Antikörper für den Nachweis von Oberflächen-PDGFRα in unfixierten oder fixierten, nicht permeabilisierten Zellen mittels Durchflusszytometrie geeignet macht.
• Für die Durchflusszytometrie sollte das APC-Konjugat titriert werden, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen, und geeignete Isotypenkontrollen sowie Fc-Rezeptor-Blockierung sollten verwendet werden, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Da dieser Antikörper mit murinem PDGFRα kreuzreagiert, sollte das Färbemuster in Maus-Zelllinien oder Primärzellen validiert werden, um die Spezifität im beabsichtigten Modellsystem zu bestätigen.
• APC ist ein heller Fluorochrom; stellen Sie eine korrekte Laser- und Filterkonfiguration sicher (z.B. 633-635 nm Anregung, 660/20 Emission) und schließen Sie Lebensfähigkeitsfarbstoffe ein, um tote Zellen auszuschließen, die Antikörper unspezifisch binden könnten.

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