APC Kaninchen anti-Mensch/Affe PD-1/CD279 mAb für Durchflusszytometrie - Q15116

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PD-1/CD279

• Programmed Cell Death Protein 1 (PD-1, CD279) ist ein inhibitorischer Rezeptor auf antigenaktivierten T-Zellen, der für die Aufrechterhaltung der Immuntoleranz und die Verhinderung von Autoimmunität essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:21276005 PMID:31754127 PMID:32184441
• Nach der Bindung an seine Liganden PD-L1 (CD274) und PD-L2 (CD273) überträgt PD-1 inhibitorische Signale, die die T-Zellrezeptor (TCR)-vermittelte Aktivierung dämpfen. Zugehörige Referenzen: PMID:21276005 PMID:26602187
• Die Ligandenbindung induziert die Phosphorylierung des ITSM-Motivs und rekrutiert die Phosphatase SHP-2 (PTPN11), die wichtige proximalen TCR-Signalkomponenten einschließlich ZAP70, PKCθ und CD3ζ dephosphoryliert. Zugehörige Referenzen: PMID:32184441
• Der PD-1-Signalweg wird von Tumorzellen genutzt, um die Anti-Tumor-Immunität zu unterdrücken; die Interaktion mit PD-L1 auf Tumorzellen hemmt die Effektorfunktion zytotoxischer T-Lymphozyten und fördert die Immunevasion. Zugehörige Referenzen: PMID:28951311
• Die therapeutische Blockade der PD-1/PD-L1-Achse kehrt die T-Zell-Erschöpfung um und stellt die Anti-Tumor-Immunantworten wieder her, was eine klinische Begründung für die Krebsimmuntherapie liefert. Zugehörige Referenzen: PMID:22658127 PMID:25034862 PMID:25399552
• PD-1 ist an der Zellmembran lokalisiert und verfügt über eine Immunglobulin-ähnliche Domäne, Disulfidbindungen und posttranslationale Modifikationen einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den APC-konjugierten Antikörper, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen; beginnen Sie mit 0,5–5 µg/mL und passen Sie sie basierend auf dem Signal-Rausch-Verhältnis an.
• Verwenden Sie einen geeigneten APC-konjugierten Kaninchen IgG-Isotypkontrolle, um unspezifische Bindung zu korrigieren.
• Führen Sie die Lebendzellfärbung bei 2–8°C durch, um die Internalisierung von PD-1 zu verhindern und eine maximale Oberflächendetektion zu gewährleisten.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Cynomolgus-Affen PD-1, was Studien an nicht-menschlichen Primaten erleichtert. Validieren Sie ihn in Ihrem relevanten Probensystem.

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