APC-Kaninchen-anti-humaner/Affen-IgM-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P01871

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der konstanten Region der Immunglobulin-Mu-Schwerkette

• Das IGHM-Gen kodiert die konstante Region der Mu-Schwerkette, die den IgM-Antikörperisotyp definiert. IgM ist der erste während der humoralen Immunität gebildete Antikörper und fungiert sowohl als membrangebundenes B-Zell-Rezeptor (BCR) als auch als sezerniertes Effektormolekül. Zugehörige Referenzen: PMID:20176268 PMID:22158414 PMID:17576170
• Sezerniertes IgM (sIgM) multimerisiert überwiegend über die Fc-Region zu Pentameren, wodurch eine hochavide Antigenbindung ermöglicht wird und konservierte körpereigene sowie pathogenabgeleitete Strukturen erkannt werden können. Zugehörige Referenzen: PMID:32029689 PMID:37095205
• sIgM vermittelt Effektorfunktionen durch Aktivierung des klassischen Komplementwegs über die Bindung an C1q und durch Interaktion mit Fc-Rezeptoren, was die Phagozytose apoptotischer Zellen und die Induktion neutralisierender IgG-Antworten fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186
• Membrangebundenes IgM bildet den BCR-Komplex, der eine konstitutive tonische Signalübertragung ermöglicht, die für das Überleben von B-Zellen wesentlich ist, und vermittelt die Prä-BCR-Signalübertragung, welche die B-Zell-Selektion und den Allelausschluss reguliert.
• IgM spielt eine entscheidende Rolle bei der Schleimhautimmunität, indem es über PIGR durch das Schleimhautepithel transzytiert wird. IgM-Antigen-Komplexe werden durch FCMR über M-Zellen retrotranszytiert, um eine Antigenpräsentation zu ermöglichen. Zugehörige Referenzen: PMID:32029689
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich an der Zellmembran (als BCR) oder im sezernierten Zustand (als löslicher Antikörper). Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die N-Glykosylierung sowie die Bildung intra- und interkettenartiger Disulfidbrücken.
• Alternatives Spleißen erzeugt membrangebundene und sezernierte Isoformen, sodass dasselbe Schwerketten-Gen sowohl Rezeptor- als auch Antikörperformen hervorbringen kann.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die konstante Region von IgM (AS 218–453). Daher ist zu erwarten, dass der Antikörper unabhängig von der Antigenspezifität gesamtes humanes IgM erkennt. Bestätigen Sie den Nachweis von sowohl löslichem als auch membrangebundenem IgM in Ihrem System.
• Dieser APC-konjugierte Antikörper eignet sich für die direkte Durchflusszytometrie ohne einen sekundären Detektionsschritt. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Fc-Blockierungsreagenzien, um den Hintergrund zu minimieren.
• Eine Kreuzreaktivität mit IgM des Cynomolgusaffen ist angegeben. Überprüfen Sie die Leistung bei Verwendung anderer Primatenspezies.
• Da das Proteingewicht der schweren Kette von sezerniertem IgM etwa 49 kDa beträgt, sollten Sie eine größenbasierte Gating-Strategie oder eine Bestätigung durch Western Blot unter reduzierenden Bedingungen in Betracht ziehen, falls dies für die Assay-Validierung erforderlich ist.
• Optimieren Sie für die intrazelluläre IgM-Färbung die Fixierungs- und Permeabilisierungbedingungen für Ihren spezifischen Zelltyp.

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