APC Kaninchen anti-Mensch/Affe CD4 monoklonaler Antikörper für FC - P01730

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD4 Funktion und Lokalisierung

• CD4 (T-Zell-Oberflächenglykoprotein, Alias T4/Leu-3) gehört zur Immunglobulin-Superfamilie und verfügt über vier extrazelluläre Ig-ähnliche Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz, der mit intrazellulären Signalmolekülen interagiert.
• Funktioniert als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle auf Antigen-präsentierenden Zellen: Nach der Antigenerkennung bindet CD4 an MHC-Klasse-II und assoziiert gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR), rekrutiert die Src-Kinase LCK zur Phosphorylierung von CD3-Ketten und initiiert die T-Zell-Aktivierung, Lymphokinproduktion und zelluläre Adhäsion.
• Unverzichtbar für die Entwicklung von T-Helferzellen im Thymus und für die Erhaltung der Funktion peripherer T-Helferzellen; löst außerdem die Differenzierung von Monozyten zu reifen Makrophagen aus.
• Wird stark auf der Oberfläche von T-Helferzellen exprimiert und in geringerem Maße auch auf anderen Immunzellen wie Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen, wo es Differenzierung, Zytokinexpression und Migration moduliert.
• Ist primär als Einzelpass-Typ-I-Membranprotein an der Zellmembran lokalisiert; Internalisierung kann durch Ligandenbindung oder virale Interaktion ausgelöst werden.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung des zytoplasmatischen Schwanzes, Palmitoylierung an einer membrannahen Cystein und N-verknüpfte Glykosylierung der extrazellulären Domänen, die für die Membranlokalisation und Proteininteraktion entscheidend sind.
• Funktioniert als Rezeptor für mehrere Viren: Es ist der primäre Rezeptor für HIV-1, bindet die virale Hüllglykoprotein gp120, um den viralen Eintritt zu vermitteln; wird durch das HIV-1 Vpu-Protein herunterreguliert und dient außerdem als Rezeptor für das menschliche Herpesvirus 7 (HHV-7). Verwandte Referenzen: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper ist mit Allophycocyanin (APC) konjugiert und wird in einem für die Durchflusszytometrie (FC) gebrauchsfertigen Format geliefert. Das Immunogen war rekombinantes humanes CD4-Protein, und der Antikörper wurde als monoklonale Quelle in Kaninchen generiert.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihre spezifische Zellart und experimentellen Bedingungen zu bestimmen. Verwenden Sie ein passendes Isotyp-Kontrollkonjugat, um unspezifische Bindung zu bewerten.
• Der Antikörper wurde validiert für die Kreuzreaktion mit menschlichem und cynomolgusem Affen-CD4. Für andere Spezies wird eine unabhängige Validierung empfohlen.
• Bereiten Sie Einzelzellsuspensionen nach Standardprotokollen zu und fügen Sie einen Vitalitätsfarbstoff hinzu, um tote Zellen für eine genaue Immunphänotypisierung auszuschließen.
• Für intrazelluläre Färbung oder kombinierte Oberflächen-/intrazelluläre Protokolle optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte nach Bedarf.

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