APC Kaninchen anti-Human IgG (Fc) Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01857

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der konstanten Region von humanem IgG1

• Immunglobulin-schwere konstante Gamma 1 (IGHG1) ist die konstante Region der schweren Gamma-1-Kette, die den IgG1-Isotyp definiert. Sie wird sowohl als membrangebundener Rezeptor auf B-Zellen als auch als sezernierter Antikörper im Plasma exprimiert.
• Membranebundenes IgG1 fungiert als B-Zell-Antigenrezeptor, der nach Antigenbindung die klonale Expansion und Differenzierung auslöst. Sezernierte IgG1-Antikörper vermitteln die Effektorphase der humoralen Immunität über ihre konstante (Fc-)Region.
• Die Antigen-bindende Region wird durch die Variable Domäne der schweren Kette gebildet, die mit der leichten Kette gepaart ist. Eine bemerkenswerte Antigenaffinität wird durch V-(D)-J-Rearrangement, somatische Hypermutation und Affinitätsreifung erreicht.
• Die konstante Region von IgG1 interagiert über ihren Fc-Teil mit Fc-Rezeptoren auf Zellen des angeborenen Immunsystems und mit dem Komplementsystem. Diese Interaktion vermittelt die antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC), die komplementabhängige Zytotoxizität (CDC) und Entzündungsreaktionen, was zur Neutralisierung von Krankheitserregern führt. Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Subzellulär kommt IgG1 sezerniert und an die Zellmembran von B-Lymphozyten verankert vor. Die membranebundene Form enthält eine Transmembranhelix.
• Zu den Hauptmerkmalen gehören Disulfidbrücken, die die Immunglobulin-Faltung stabilisieren, Glykosylierungsstellen, die für Effektorfunktionen wichtig sind, und die Fähigkeit zu alternatives Spleißen. Die Entstehung von IgG1 beinhaltet Klassenwechsel-Rekombination von IgM/IgD, wodurch das Antikörper-Repertoire diversifiziert wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem rekombinanten Fragment der Fc-Region; daher reagiert der Antikörper mit der konstanten Region der schweren Ketten von humanem IgG1. Es wird erwartet, dass er sowohl die membrangebundene als auch die sezernierte Form erkennt.
• Dieses Konjugat ist für die Durchflusszytometrie validiert. Für optimale Ergebnisse titrieren Sie den Antikörper an der Zielzellpopulation, um die Sättigungskonzentration zu bestimmen und den Hintergrund zu minimieren. Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen.
• Als APC-konjugiertes Reagenz schützen Sie den Antikörper vor längerer Lichteinwirkung und vermeiden Sie mehrfaches Einfrieren und Auftauen. Lagern Sie das Produkt gemäß den Anweisungen des Herstellers.
• Verwenden Sie in der Durchflusszytometrie gegebenenfalls einen Viabilitätsfarbstoff, um tote Zellen auszuschließen, da diese Antikörper unspezifisch binden können. Bestätigen Sie die Spezifität durch Färbung von Zellen mit bekanntem IgG-Expressionsprofil.

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