APC Kaninchen Anti-Mensch EGFR Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EGFR

• Der Epidermale Wachstumsfaktorrezeptor (EGFR) ist eine prototypische Rezeptor-Tyrosinkinase, die nach Bindung von Liganden der EGF-Familie Homo- oder Heterodimerisierung und Autophosphorylierung durchläuft. Dies aktiviert wichtige nachgeschaltete Signalkaskaden wie RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC und STATs (PubMed:27153536, PubMed:2790960). Zugehörige Referenzen: PMID:27153536, PMID:2790960
• Bekannte EGFR-Liganden umfassen EGF, TGF-α, Amphiregulin (AREG), Epigen (EPGN), Betazellulin (BTC), Epiregulin (EREG) und heparinbindender EGF-ähnlicher Wachstumsfaktor (HBEGF), die jeweils unterschiedliche Signaldynamiken auslösen (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Zugehörige Referenzen: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Phosphoryliertes EGFR rekrutiert Adaptorproteine wie GRB2 und initiiert so komplexe intrazelluläre Signalwege, die Zellproliferation, Überleben, Migration und Differenzierung steuern (PubMed:10805725). Zugehörige Referenzen: PMID:10805725
• Über kanonische Signalwege hinaus phosphoryliert EGFR direkt Substrate wie RGS16 (Kopplung an G-Protein-Signalwege) (PubMed:11602604) und MUC1 (fördert die Wechselwirkung zwischen SRC und β-Catenin) (PubMed:11483589). Zugehörige Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFR moduliert die Zellmotilität durch Interaktion mit CCDC88A/GIV, das den Rezeptor an der Plasmamembran hält, um die migrationsfördernde Signalgebung aufrechtzuerhalten (PubMed:20462955). Zugehörige Referenzen: PMID:20462955
• Es kann auch die NF-κB-Kaskade aktivieren (PubMed:11116146) und trägt zu neurologischen Prozessen wie Lernen, Gedächtnis und Schmerzüberempfindlichkeit bei (Nach Ähnlichkeit). Zugehörige Referenzen: PMID:11116146
• Isoform 2 wirkt als potenzieller Antagonist der EGF-Wirkung und wird insbesondere bei Ovarialkarzinomen exprimiert.
• Die subzelluläre Lokalisation erstreckt sich über Plasmamembran, Endoplasmatisches Retikulum, Golgi-Apparat, Endosomen und Zellkern; der Rezeptor kann auch sekretiert werden. Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Palmitoylierung.
• EGFR dient als Wirtszellrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) in Hepatozyten und erleichtert die Bildung des CD81-CLDN1-Komplexes.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 335–525 innerhalb der extrazellulären Domäne von humanem EGFR, wodurch dieser APC-konjugierte Antikörper besonders gut für den Nachweis von oberflächenständigem EGFR durch direkte Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Da EGFR ubiquitär exprimiert wird, verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und erwägen Sie die Verwendung einer bekannten EGFR-positiven Zelllinie (z. B. A431 oder HeLa) für die erste Einrichtung.
• Für ein optimales Signal titrieren Sie den Antikörper, um die beste Färbekonzentration zu ermitteln und validieren Sie unter Ihren spezifischen experimentellen Bedingungen.
• Bei einer Co-Färbung mit anderen Fluorophoren überprüfen Sie die spektrale Kompatibilität und führen Sie Kompensationskontrollen durch.

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