APC Kaninchen anti-Human CD95/FAS monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P25445

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD95/FAS-Funktion und -Lokalisierung

• CD95/FAS (TNFRSF6) ist ein Mitglied der Superfamilie der Tumornekrosefaktor-Rezeptoren, auch bekannt als Apo-1-Antigen oder FASLG-Rezeptor.
• Es fungiert als Oberflächenrezeptor für TNFSF6/FASLG und überträgt apoptotische Signale nach Ligandenbindung.
• Die durch Liganden induzierte Trimerisierung rekrutiert den Adaptor FADD und Prokaspase-8, bildet den den Tod induzierenden Signalkomplex (DISC), der die Kaskade der Caspasen aktiviert und zur Apoptose führt.
• Die FAS-vermittelte Apoptose spielt eine kritische Rolle bei der peripheren immunologischen Toleranz und der aktivierungsinduzierten Zellreifung reifer T-Zellen.
• Alternativ gespleißte sezernierte Isoformen (Isoformen 2–6) können als Köder-Rezeptoren wirken und die Apoptose in vitro blockieren.
• Das Protein lokalisiert sich primär zur Zellmembran und Membran-Rafts; lösliche Isoformen werden ebenfalls sezerniert.
• Isoform 1 und Isoform 6 werden in ruhenden peripheren Blutmononukleärzellen auf vergleichbarem Niveau exprimiert; nach Aktivierung steigen die Isoform-1-Spiegel an, während Isoform 6 abnimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Palmitoylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung mit einem scheinbaren Molekulargewicht von ~38 kDa (glykosyliert; theoretisch 37,7 kDa).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 26–173), was die Erkennung des nativen Oberflächenrezeptors gewährleistet.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Färbebedingungen zu ermitteln, und verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen.
• CD95/FAS wird auf verschiedenen Immunzellen exprimiert, einschließlich aktivierter T- und B-Lymphozyten; überprüfen Sie die Expression in Ihrer Zielpopulation durch Pilotexperimente.
• Da dieser Antikörper APC-konjugiert ist, vermeiden Sie Lichtexposition und sorgen Sie dafür, dass der Durchflusszytometer für den APC-Kanal korrekt kompensiert ist.

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