APC Kaninchen Anti-Mensch CD81 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P60033

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD81

• CD81 (auch bekannt als TAPA-1 oder Tspan28) ist ein 26 kDa schweres Tetraspanin mit mehreren Transmembrandomänen und einer konservierten Disulfidbindung, das als strukturelle Komponente spezialisierter Membranmikrodomänen fungiert.
• Auf aktivierten B-Zellen organisiert CD81 tetraspaninangereicherte Mikrodomänen (TERMs), die für den Trafficking und die Kompartimentierung von CD19 essenziell sind, und senkt dadurch die Schwelle für die B-Zellrezeptor (BCR)-vermittelte Aktivierung und Antikörperproduktion. Verwandte Referenzen: PMID:16449649, PMID:20237408, PMID:27881302, PMID:15161911
• In T-Zellen erleichtert CD81 die Lokalisation von CD3 Zeta an immunologischen Synapsen und trägt zur Kostimulation und Polarisation hin zu einem T-Helfer-Phänotyp vom Typ 2 bei. Verwandte Referenzen: PMID:22307619, PMID:23858057, PMID:8766544
• Es ist in MHC-Klasse-II-Kompartimenten vorhanden und kann auch eine Rolle bei der Antigenpräsentation spielen. Verwandte Referenzen: PMID:8409388, PMID:8766544
• CD81 reguliert die Fusion von Makrophagen zu mehrkernigen Riesenzellen negativ, indem es mit CD9 und Beta-1/Beta-2-Integrinen assoziiert. Verwandte Referenzen: PMID:12796480
• In T-Zellen kontrolliert CD81 die intrazellulären dNTP-Spiegel, indem es die proteasomale Degradation der dNTPase SAMHD1 steuert. Verwandte Referenzen: PMID:28871089
• CD81 fungiert als kritischer Rezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) in Hepatozyten und bildet einen Komplex mit Claudin-1 (CLDN1). Es ist auch spezifisch erforderlich für die Infektiosität von Plasmodium falciparum-Sporozoiten in menschlichen Leberzellen.
• Subzellulär lokalisiert sich CD81 an der Zellmembran, insbesondere im basolateralen Bereich. Es wird auf B-Zellen, Hepatozyten, Monozyten/Makrophagen sowie sowohl naiven als auch Gedächtnis-CD4+-T-Zellen exprimiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der großen extrazellulären Schleife (LEL, Aminosäuren 114-199) von humanem CD81, einer Domäne, die an der Ligandenbindung und viralen Interaktionen beteiligt ist. Antikörper, die gegen diese Region gerichtet sind, können native Konformationen erkennen und eignen sich oft für die Oberflächenfärbung in der Durchflusszytometrie.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie das APC-Konjugat, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren, und verwenden Sie bekannte positive (z. B. periphere Blut-B-Zellen oder CD81-transfizierte Linien) und negative Kontrollen, um das Gating festzulegen.
• Aufgrund der breiten Expression von CD81 auf Leukozyten und Hepatozyten sollten Sie geeignete Isotypkontrollen verwenden und eine Doppelfärbung mit Linienmarkern in Betracht ziehen, um die zelltypspezifische Expression genau zu bestimmen.
• Wenn Sie diesen Antikörper zur Untersuchung des CD81-vermittelten Viruseintritts oder der Rezeptorclusterung verwenden, validieren Sie ihn im relevanten Probensystem (z. B. primäre Hepatozyten oder B-Zelllinien) unter Aktivierungsbedingungen, um eine korrekte Detektion sicherzustellen.

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