APC-Kaninchen anti-Mensch CD162/PSGL-1 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q14242

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: P-Selektin-Glykoproteinligand 1 (CD162/PSGL-1) Funktion und Lokalisation

• CD162/PSGL-1 ist ein Proteoglykan vom SLe(x)-Typ, das als primärer Ligand für P-, E- und L-Selektine dient und während der Entzündung die schnelle Rollbewegung von Leukozyten auf dem Gefäßendothel vermittelt.
• Das Protein liegt aufgrund von alternativem Spleißen in mehreren Isoformen vor, was seine Bindungseigenschaften oder Expression modulieren kann.
• Es wird überwiegend auf der Oberfläche von Neutrophilen, Monozyten und den meisten Lymphozyten exprimiert und spielt eine entscheidende Rolle beim Transport von Leukozyten.
• Die subzelluläre Lokalisation liegt hauptsächlich an der Plasmamembran (Membran; Einpass-Typ-I-Membranprotein).
• PSGL-1 ist stark posttranslational modifiziert, einschließlich Sulfatierung, Sialylierung und O-Glykosylierung, die für die Selektrbindung essenziell sind; weitere Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Disulfidbindungsbildung und Bildung von N-terminalem Pyroglutaminsäure.
• Zusätzlich zu seiner Rolle bei der Zelladhäsion wirkt PSGL-1 als Rezeptor für Enterovirus 71 und erleichtert den viralen Eintritt in Wirtszellen.
• Das Protein enthält ein Signalpeptid, eine extrazelluläre mukinartige Domäne mit dekamerischen Wiederholungen, eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Da das Immunogen der extrazellulären Domäne (AA 42-295) entspricht, wird erwartet, dass der resultierende Antikörper die native transmembranäre Form von CD162/PSGL-1 auf lebenden Zellen erkennt, was ihn besonders geeignet für die Durchflusszytometrie (FC) macht.
• Optimieren Sie für FC-Anwendungen die Antikörpertitration und erwägen Sie die Verwendung geeigneter Isotypkontrollen, um die Spezifität sicherzustellen – insbesondere angesichts der potenziellen Fc-Rezeptorbindung auf Leukozyten.
• Validieren Sie die Expression von CD162 in Zielzellpopulationen (z. B. periphere Blutleukozyten, aktivierte T-Zellen oder geeignete Zelllinien) vor der Verwendung, da die Expressionslevel je nach Zellaktivierungszustand variieren können.
• Da PSGL-1 ein stark glykosyliertes Protein ist, kann das erkannte Epitop konformationsabhängig sein; denaturierende Bedingungen können die Antikörperbindung in alternativen Anwendungen wie dem Western Blot beeinträchtigen.
• Das APC-Konjugat ermöglicht eine direkte Fluoreszenzdetektion und beseitigt die Notwendigkeit sekundärer Reagenzien; sorgen Sie für eine korrekte Kompensation in mehrfarbigen Durchflusszytometrie-Panels, um spektrale Überlappung zu vermeiden.

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