APC Kaninchen Anti-Mensch CD117/c-Kit Monoklonaler Antikörper für FC - P10721

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit, auch bekannt als Mast-/Stammzell-Wachstumsfaktorrezeptor Kit, ist eine transmembranäre Rezeptor-Tyrosinkinase, die vom KIT-Protoonkogen kodiert wird. Er gehört zur Familie der Typ-III-Rezeptor-Tyrosinkinasen und zeichnet sich durch extrazelluläre immunoglobulinähnliche Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und eine geteilte intrazelluläre Kinasedomäne aus.
• Die Hauptfunktion von CD117/c-Kit ist die Rolle als Zelloberflächenrezeptor für den Stammzellfaktor (SCF/KITLG). Nach Ligandenbindung dimerisiert KIT, was zur Autophosphorylierung und Aktivierung mehrerer nachgeschalteter Signalkaskaden führt, einschließlich der PI3K/AKT-, RAS/MAPK- und JAK/STAT-Signalwege.
• Über diese Signalwege reguliert CD117/c-Kit essenzielle zelluläre Prozesse wie Zellüberleben, Proliferation, Differenzierung und Migration. Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Hämatopoese, Erhaltung von Stammzellen, Gametogenese, Melanogenese sowie der Entwicklung und Funktion von Mastzellen.
• CD117/c-Kit ist überwiegend an der Zellmembran lokalisiert, kann aber nach Aktivierung internalisiert werden und vor dem Abbau oder Recycling vorübergehend im Zytoplasma nachgewiesen werden.
• Das Protein erfährt mehrere posttranslationale Modifikationen, einschließlich N-verknüpfter Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Ubiquitinierung. Ligandeninduzierte Phosphorylierung an mehreren Tyrosinresten erzeugt Bindungsstellen für SH2-Domänen enthaltende Signalproteine und propagiert so das Signal.
• Im menschlichen Hoden wird CD117/c-Kit in Spermatogonien und interstitiellen Leydig-Zellen exprimiert, nicht jedoch in Sertoli-Zellen oder Spermatozyten. Seine Expression bleibt in ejakulierten Spermatozoen erhalten. Verwandte Referenzen: PMID:20601678

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses Antikörpers verwendete Immunogen umfasst die Aminosäuren 26-520 von humanem CD117/c-Kit, was der extrazellulären Domäne entspricht. Dieses Design kann Spezifität für den nativen Rezeptor an der Zelloberfläche verleihen.
• Dieser Antikörper ist an APC (Allophycocyanin) für direkte durchflusszytometrische Anwendungen konjugiert. Verwenden Sie geeignete Kompensationskontrollen bei der Durchführung von mehrfarbiger Durchflusszytometrie und vermeiden Sie längere Lichteinwirkung, um die Fluorophorstabilität zu erhalten.
• Für die Durchflusszytometrie validieren Sie den Antikörper an humanen Zelllinien, die bekanntermaßen CD117 exprimieren (z. B. HEL, M-07e oder primäre Knochenmarkszellen). Fügen Sie eine geeignete Isotypkontrolle hinzu, um unspezifische Bindung zu bewerten.
• Die optimale Antikörperkonzentration sollte durch Titrationsexperimente im jeweiligen experimentellen System bestimmt werden. Zellfixierung und Permeabilisierung können die Bindung dieses Antikörpers beeinträchtigen, bewerten Sie daher die Kompatibilität, wenn auch intrazelluläre Ziele gefärbt werden.

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