APC-konjugierter monoklonaler Kaninchen-Antikörper gegen humanes CD30 für die Durchflusszytometrie – P28908

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD30

• CD30 (Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilienmitglied 8, auch als Ki-1-Antigen oder CD30L-Rezeptor bezeichnet) ist ein durch das TNFRSF8-Gen codierter Transmembranrezeptor.
• Es fungiert als Rezeptor für TNFSF8/CD30L (PubMed:8391931), und die Ligandenbindung kann an der Regulierung des Zellwachstums und der Transformation aktivierter Lymphoblasten beteiligt sein. Zugehörige Referenzen: PMID:8391931
• Die CD30-Signalübertragung aktiviert NF-kappa-B und beeinflusst dadurch die Genexpression in Immunzellen (PubMed:8999898). Zugehörige Referenzen: PMID:8999898
• Auf subzellulärer Ebene ist CD30 in der Zellmembran und im Zytoplasma lokalisiert.
• Auf Proteinebene wird CD30 in alveolären Makrophagen nachgewiesen, was auf eine gewebespezifische Expression hinweist.
• Das CD30-Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, darunter Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung. Alternatives Spleißen und alternative Initiation erzeugen mehrere Isoformen mit beobachteten Molekulargewichten von etwa 14 kDa, 50 kDa und 63 kDa.
• Zu den strukturellen Merkmalen gehören ein N-terminales Signalpeptid, mehrere zysteinreiche Wiederholungen, eine Transmembrandomäne und ein zytoplasmatischer Schwanz.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser APC-konjugierte monoklonale Kaninchen-Antikörper ist für die Durchflusszytometrie (FC) vorgesehen. Ermitteln Sie die optimale Antikörperkonzentration durch Titration an CD30-positiven Zelllinien oder stimulierten Lymphozyten.
• Da CD30 auf aktivierten T- und B-Zellen exprimiert wird, sollten Sie eine PMA/Ionomycin-Stimulation oder von Hodgkin-Lymphomen abgeleitete Zelllinien (z. B. L428, KM-H2) als Positivkontrollen in Betracht ziehen.
• Verwenden Sie eine geeignete Isotypkontrolle (APC-konjugiertes Kaninchen-IgG) und ein Fc-Rezeptor-Blockierungsreagenz, um die unspezifische Bindung zu minimieren.
• Bei der Färbung von Vollblut oder PBMC kann nach der Oberflächenfärbung ein Erythrozytenlysierschritt durchgeführt werden, sofern die Stabilität des Fluorophors bestätigt wurde.

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