APC-konjugierter Anti-CD223/LAG-3 Kaninchen-Monoklonalantikörper für Durchflusszytometrie - P18627

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LAG3-Funktion und -Lokalisierung

• Das Lymphozyten-Aktivierungs-Gen-3-Protein (auch bekannt als CD223), kodiert durch das LAG3-Gen, ist ein Typ-I-Transmembranprotein der Immunglobulin-Superfamilie mit einem Molekulargewicht von ca. 57 kDa.
• Fungiert als inhibitorischer Rezeptor auf antigenaktivierten T-Zellen, der negative Signale übermittelt, wenn es an seinen Hauptliganden MHC-Klasse-II auf antigenpräsentierenden Zellen oder an FGL1 bindet, wodurch die T-Zell-Rezeptor-(TCR)-Signalgebung und die T-Zell-Aktivierung gehemmt werden. Verwandte Referenzen: PMID:20421648, PMID:35761082, PMID:7805750, PMID:30580966, PMID:32920841
• Die Ligandenbindung induziert die Ubiquitinierung des KIEELE-Motivs, legt das RRFSALE-Motiv frei und fördert die Bildung von Kondensaten mit der TCR-Komponente CD3E, was die CD3E-LCK-Assoziation stört und die TCR-Aktivierung blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:40101708, PMID:40592325
• Reguliert negativ die Proliferation, Aktivierung, Effektorfunktion und Homöostase sowohl von CD4+- als auch von CD8+-T-Zellen und trägt zur unterdrückenden Funktion regulatorischer T-Zellen (Tregs) sowie zur Regulation plasmazytoider dendritischer Zellen bei. Verwandte Referenzen: PMID:20421648, PMID:7805750, PMID:8647185
• Der von LAG3 vermittelte inhibitorische Weg wird von Tumoren ausgenutzt, um die anti-tumorale Immunität abzuschwächen; die gleichzeitige Blockade von LAG3 und PD-1 kehrt die Erschöpfung der T-Zellen um und normalisiert die anti-tumorale Reaktion, was eine Grundlage für die Krebsimmuntherapie bietet. Verwandte Referenzen: PMID:35981087, PMID:40101708
• Kann auch als Ligand für MHC-Klasse-II auf antigenpräsentierenden Zellen fungieren, deren Aktivierung fördern und Th1-Immunantworten antreiben.
• Subzelluläre Lokalisierung: primär an der Zellmembran; es existiert auch eine sekretierte Form. Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbrücken, Glykosylierung und alternatives Spleißen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 23-430) von humanem LAG3, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop erkennt, das auf der Zelloberfläche zugänglich ist; ideal geeignet für die Durchflusszytometrie-Analyse lebender Zellen.
• Da der Antikörper direkt mit APC konjugiert ist, ermöglicht er eine Einfachfärbung ohne einen Sekundärreagenz, wodurch der Hintergrund reduziert und der Arbeitsablauf vereinfacht wird.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Versuchsbedingungen zu ermitteln. Fügen Sie einen geeigneten Isotyp-Kontrolle ein, um die unspezifische Bindung zu beurteilen.
• Überprüfen Sie die Expression in aktivierten T-Zell-Populationen oder LAG3-positiven Zelllinien. Die Oberflächenfärbung erfordert möglicherweise frische, unfixierte Zellen; wenn eine Fixierung verwendet wird, überprüfen Sie die Kompatibilität mit dem APC-Fluorophor.

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