APC Anti-Maus CD163 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q2VLH6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD163-Funktion und -Lokalisierung

• CD163, auch bekannt als Scavenger-Rezeptor-Cystein-reicher Typ-1-Protein M130, ist ein Mitglied der Scavenger-Rezeptor-Cystein-reichen (SRCR) Superfamilie. Es wird hauptsächlich auf Monozyten und reifen Makrophagen exprimiert, einschließlich der Kupffer-Zellen in der Leber, der Makrophagen der roten Pulpa in der Milz und der mesenterialen Lymphknoten-Makrophagen.
• Das Protein fungiert bei der Clearance und Endozytose von Hämoglobin/Haptoglobin (Hb/Hp)-Komplexen durch Makrophagen. Dieser Prozess schützt Gewebe vor oxidativen Schäden durch freies Hämoglobin und erleichtert das Eisen-Recycling durch Häm-Abbau.
• Die Bindung von CD163 an Hb/Hp-Komplexe ist kalziumabhängig und pH-abhängig. Nach der Ligandenbindung löst CD163 intrazelluläre Signalkaskaden aus, die eine tyrosinkinaseabhängige Kalziummobilisierung und die Produktion von Inositoltriphosphat beinhalten, was zur Sekretion von IL-6 und CSF-1 führt.
• Eine lösliche Form (sCD163) wird durch Abspaltung der Ektodomäne gebildet. Erhöhte Spiegel von sCD163 sind mit entzündlichen Zuständen verbunden, wobei es eine entzündungshemmende Rolle spielen kann, indem es als Köder-Rezeptor wirkt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie verwenden Sie den direkt konjugierten APC-Antikörper. Führen Sie eine Titerbestimmung durch, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu ermitteln, und fügen Sie immer einen geeigneten Isotyp-Kontrollantikörper hinzu.
• Dieser Antikörper zielt auf die Aminosäuren 39–260 der extrazellulären Domäne ab, die auf der Zelloberfläche zugänglich ist. Er eignet sich für die Färbung von lebenden Zellen ohne Permeabilisierung.
• Validieren Sie die Reaktivität in relevanten Maus-Gewebeproben, von denen bekannt ist, dass sie CD163 exprimieren, wie Milz, Leber oder Lymphknoten. Eine enzymatische Verdauung kann die Rückgewinnung von Makrophagen für die Färbung verbessern.
• Da die CD163-Expression moduliert werden kann, sollten Sie in Betracht ziehen, Zellen mit IL-10 oder Glukokortikoiden zu behandeln, um den Nachweis in vitro zu verbessern, wenn die Expressionslevel niedrig sind.
• Verwenden Sie eine Blockierung der Fc-Rezeptoren (z. B. anti-CD16/CD32) vor der Färbung, um unspezifische Bindungen an Fc-Rezeptoren auf Makrophagen zu minimieren.

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